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目的:应用MTT酶标分析法,检测在不同浓度、不同时长氧化低密度脂蛋白( ox-LDL)干预下的大鼠肾小球系膜细胞( RMC)的增殖情况以及不同浓度ox-LDL干预下LOX-1和TNF-α的表达,探讨其相互关系。方法:体外培养RMC,使用不同浓度ox-LDL在不同时间对RMC干预,经MTT法检测,并进行分组分析。用浓度为5μg/ml和50μg/ml的ox-LDL干预RMC 24 h,使用RT-PCR法和Western blot法检测LOX-1和TNF-α的mRNA和蛋白表达量,并进行分析比较。结果:Ox-LDL干预RMC 在时间点为24 h的结果显示,在1~30μg/ml范围内呈生长促进效应,浓度大于30μg/ml后呈生长抑制效应;干预48 h组对细胞效应趋势基本与作用24 h后一致,但生长抑制效应从30μg/ml开始;而72 h组,ox-LDL在各个浓度均显示出生长抑制效应。5μg/ml及50μg/ml浓度ox-LDL干预RMC后,均可使LOX-1和TNF-α的mRNA和蛋白表达升高,且50μg/ml较5μg/ml效果明显,结果差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Ox-LDL对RMC增殖影响具有浓度及时间依赖性。较低及较高浓度ox-LDL均能导致RMC中LOX-1和TNF-α的表达增高,且浓度较高时效果更明显。其机制可能为ox-LDL导致LOX-1表达增多,引起炎症因子的产生和趋化,发生细胞损伤,提示脂质代谢紊乱在肾脏疾病中的重要作用。

作者:廖江铨;杜金行

来源:中国中西医结合肾病杂志 2014 年 4期

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作者:
廖江铨;杜金行
来源:
中国中西医结合肾病杂志 2014 年 4期
标签:
氧化低密度脂蛋白 肾小球系膜细胞 LOX-1 炎症因子 Oxidized low-density lipoprotein Mesangial cells LOX-1 Inflammatory cytokines
目的:应用MTT酶标分析法,检测在不同浓度、不同时长氧化低密度脂蛋白( ox-LDL)干预下的大鼠肾小球系膜细胞( RMC)的增殖情况以及不同浓度ox-LDL干预下LOX-1和TNF-α的表达,探讨其相互关系。方法:体外培养RMC,使用不同浓度ox-LDL在不同时间对RMC干预,经MTT法检测,并进行分组分析。用浓度为5μg/ml和50μg/ml的ox-LDL干预RMC 24 h,使用RT-PCR法和Western blot法检测LOX-1和TNF-α的mRNA和蛋白表达量,并进行分析比较。结果:Ox-LDL干预RMC 在时间点为24 h的结果显示,在1~30μg/ml范围内呈生长促进效应,浓度大于30μg/ml后呈生长抑制效应;干预48 h组对细胞效应趋势基本与作用24 h后一致,但生长抑制效应从30μg/ml开始;而72 h组,ox-LDL在各个浓度均显示出生长抑制效应。5μg/ml及50μg/ml浓度ox-LDL干预RMC后,均可使LOX-1和TNF-α的mRNA和蛋白表达升高,且50μg/ml较5μg/ml效果明显,结果差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Ox-LDL对RMC增殖影响具有浓度及时间依赖性。较低及较高浓度ox-LDL均能导致RMC中LOX-1和TNF-α的表达增高,且浓度较高时效果更明显。其机制可能为ox-LDL导致LOX-1表达增多,引起炎症因子的产生和趋化,发生细胞损伤,提示脂质代谢紊乱在肾脏疾病中的重要作用。