目的:本研究旨在观察陈氏益气活血化湿方水溶剂对氨基核苷嘌呤霉素(puromycin aminonucleoside,PAN)诱导足细胞损伤的保护作用,并探讨这一作用与足细胞自噬(autophagy)的关系.方法:体外培养永生化小鼠足细胞系作为研究对象,采用细胞增殖检测试剂盒(CCK-8法)、western bloting法检测不同浓度PAN对足细胞的存活率的影响,建立PAN诱导的足细胞损伤模型.后将足细胞分为:正常组、PAN组、PAN+中药低剂量组、PAN+中药高剂量组,采用western bloting法检测足细胞p-mTOR、mTOR、LC3、synaptopodin蛋白的表达情况.结果:(1)CCK-8、western bloting检测结果显示50 μg/ml浓度时P-mTOR表达最明显(P＜0.001),确定为造模浓度;(2)PAN造成足细胞p-mTOR表达升高,LC3Ⅱ、synaptopodin蛋白表达降低(P＜0.05),mTOR磷酸化水平升高,足细胞自噬功能受到抑制,足细胞骨架蛋白表达降低(P＜0.01),足细胞受损;(3)陈氏益气活血化湿方水溶剂处理细胞后p-mTOR表达降低,LC3Ⅱ、synaptopodin蛋白表达升高(P＜0.05),且高剂量组效果优于低剂量组.结论:陈氏益气活血化湿方水溶剂可能是通过上调足细胞自噬功能,发挥足细胞保护作用.
作者：凌春燕；张先闻；王琳
来源：中国中西医结合肾病杂志 2018 年 19卷 9期
