目的:探讨人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)发生内质网应激时,NGAL表达增加的上游调控机制.方法:将HK-2细胞分为对照组(正常HK-2细胞),TG(毒胡萝卜素,thapsigargin)组(5μmol/L TG处理8h),单纯转染组(siRNA-ATF4试剂转染24 h),转染+TG组(siRNA-ATF4试剂转染24 h后,5μmol/L TG处理8h),阴性对照组(siRNA-阴性对照物转染24 h),DMSO组(5μmol/L DMSO处理8h).采用Western blot检测各组细胞内质网源性转录因子(CHOP)、内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、中性粒细胞明胶酶相关性载脂蛋白(NGAL)、激活转录因子4(ATF4)的表达,采用Real-time PCR方法测得ATF4mRNA、NGALmRNA表达量.结果:与对照组相比,TG组细胞NGAL、ATF4、ATF4mRNA、NGALmRNA表达量显著提高(P＜0.05),而转染+TG组、单纯转染组、阴性对照组、DMSO组中ATF4及NGAL差异无统计学意义(P＞0.05).与TG组相比,转染+TG组ATF4、NGAL、ATF4mRNA及NGALmRNA表达量呈显著降低趋势(P＜0.05).在TG组与转染+ TG组细胞中,CHOP和GRP78呈过表达状态(P＜0.05),而转染+TG组细胞CHOP和GRP78提升趋势明显低于TG组细胞(P＜0.05).结论:(1)TG可诱导人肾小管上皮HK-2细胞发生内质网应激反应.(2)HK-2细胞发生内质网应激反应时,抑制ATF4表达会引起NGAL降低,提示ATF4是NGAL表达的上

作者：傅桐；侯玲；范洋；杜悦

来源：中国中西医结合肾病杂志 2020 年 21卷 4期