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目的:探讨大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)分离、培养及鉴定的方法.方法:采用Dobbs法提取ATⅡ.肺动脉灌洗减少肺内红细胞,气管灌洗除去肺泡腔内的白细胞,将胰蛋白酶、胶原酶灌入肺内消化分离细胞;采用免疫贴附法纯化细胞,将细胞悬液培养于覆被IgG的平皿中,有Fc段受体的细胞被黏附,而无Fc段受体的ATⅡ得以纯化.ATⅡ的鉴定采用电镜和肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)免疫组化染色,其在电镜下有特征性板层小体,免疫组化染色见胞浆有SP-A表达.结果:纯化后台盼蓝染色显示细胞活力为95

作者:张雪梅;陈海龙;王朝晖;张利;纪军

来源:中国中西医结合外科杂志 2011 年 17卷 5期

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作者:
张雪梅;陈海龙;王朝晖;张利;纪军
来源:
中国中西医结合外科杂志 2011 年 17卷 5期
标签:
肺泡Ⅱ型上皮细胞 肺表面活性物质相关蛋白A 细胞培养
目的:探讨大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)分离、培养及鉴定的方法.方法:采用Dobbs法提取ATⅡ.肺动脉灌洗减少肺内红细胞,气管灌洗除去肺泡腔内的白细胞,将胰蛋白酶、胶原酶灌入肺内消化分离细胞;采用免疫贴附法纯化细胞,将细胞悬液培养于覆被IgG的平皿中,有Fc段受体的细胞被黏附,而无Fc段受体的ATⅡ得以纯化.ATⅡ的鉴定采用电镜和肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)免疫组化染色,其在电镜下有特征性板层小体,免疫组化染色见胞浆有SP-A表达.结果:纯化后台盼蓝染色显示细胞活力为95