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目的 研究微小RNA-155(miR-155)/磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)在高糖诱导视网膜微血管内皮细胞(HRCEC)凋亡中的作用及机制.方法 培养HRCEC并分为miR-NC组、miR-NC+高糖组、miR-155+高糖组、miR-NC+空白质粒组、miR-NC+空白质粒+高糖组、miR-155+空白质粒组+高糖组、miR-155+PTEN质粒组+高糖组,转染阴性对照(NC)序列、miR-155模拟物、空白质粒、PTEN质粒.转染后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-155表达水平,四唑氮化合物(MTS)法检测细胞活力,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡率,Western Blot检测PTEN、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达水平,双荧光素酶报告基因验证miR-155靶向PTEN基因mRNA3'UTR.结果 (1)miR-155表达:与miR-NC+高糖组比较,转染miR-155模拟物显著增加高糖环境下HRCEC中miR-155的表达,差异具有统计学意义(t=4.069,P=0.004);(2)细胞活力:与miR-NC+高糖组比较,转染miR-155模拟物显著提高高糖环境下HRCEC的OD490水平、抑制细胞凋亡,差异均有统计学意义(tOD490=2.907,P=0.020;t凋亡率=5.957,P=0.000);与miR-155+空白质粒组+高糖组比较,转染miR-155模拟物及PTEN质粒显著降低高糖环境下HRCEC的OD490水平、促进细胞凋亡,差异均有统计学意义(t0D490=3.777,P

作者:蔡文丽;谢红波

来源:中国中医眼科杂志 2022 年 32卷 5期

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作者:
蔡文丽;谢红波
来源:
中国中医眼科杂志 2022 年 32卷 5期
标签:
糖尿病视网膜病变 视网膜微血管内皮细胞 miR-155 凋亡 磷脂酶和张力蛋白同源物 靶基因
目的 研究微小RNA-155(miR-155)/磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)在高糖诱导视网膜微血管内皮细胞(HRCEC)凋亡中的作用及机制.方法 培养HRCEC并分为miR-NC组、miR-NC+高糖组、miR-155+高糖组、miR-NC+空白质粒组、miR-NC+空白质粒+高糖组、miR-155+空白质粒组+高糖组、miR-155+PTEN质粒组+高糖组,转染阴性对照(NC)序列、miR-155模拟物、空白质粒、PTEN质粒.转染后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-155表达水平,四唑氮化合物(MTS)法检测细胞活力,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡率,Western Blot检测PTEN、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达水平,双荧光素酶报告基因验证miR-155靶向PTEN基因mRNA3'UTR.结果 (1)miR-155表达:与miR-NC+高糖组比较,转染miR-155模拟物显著增加高糖环境下HRCEC中miR-155的表达,差异具有统计学意义(t=4.069,P=0.004);(2)细胞活力:与miR-NC+高糖组比较,转染miR-155模拟物显著提高高糖环境下HRCEC的OD490水平、抑制细胞凋亡,差异均有统计学意义(tOD490=2.907,P=0.020;t凋亡率=5.957,P=0.000);与miR-155+空白质粒组+高糖组比较,转染miR-155模拟物及PTEN质粒显著降低高糖环境下HRCEC的OD490水平、促进细胞凋亡,差异均有统计学意义(t0D490=3.777,P