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该研究通过限制性胃蛋白酶酶解法提取蕲蛇中Ⅱ型胶原蛋白(typeⅡcollagen,CⅡ),并采用离子交换色谱法对其进行纯化,所得蛋白通过SDS-PAGE凝胶电泳、紫外分光光度法、红外吸收光谱法和质谱法进行表征鉴定,结果显示,蕲蛇CⅡ相对分子质量约为130 kDa,其紫外吸收峰约为223 nm;红外图谱中在1 200 ~1 450 cm-具有特征吸收,表明蕲蛇CⅡ中有特征序列Gly-X-Y肽段,存在三股螺旋结构.通过对蕲蛇CⅡ与牛CⅡ进行蛋白质肽段质谱图分析对照后发现,两者具有相似肽段和CⅡ结构特征.以上鉴定表征结果证明采用酶解法提取蛋白为蕲蛇CⅡ,可为蕲蛇药材CⅡ的进一步药理研究提供实验基础.

作者:谷恒存;胡金波;丁志山;范永升;丁兴红

来源:中国中药杂志 2013 年 38卷 21期

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作者:
谷恒存;胡金波;丁志山;范永升;丁兴红
来源:
中国中药杂志 2013 年 38卷 21期
标签:
蕲蛇 Ⅱ型胶原蛋白 胃蛋白酶 提取 表征 Agkistrodon acutus type Ⅱ collagen pepsase extract identify
该研究通过限制性胃蛋白酶酶解法提取蕲蛇中Ⅱ型胶原蛋白(typeⅡcollagen,CⅡ),并采用离子交换色谱法对其进行纯化,所得蛋白通过SDS-PAGE凝胶电泳、紫外分光光度法、红外吸收光谱法和质谱法进行表征鉴定,结果显示,蕲蛇CⅡ相对分子质量约为130 kDa,其紫外吸收峰约为223 nm;红外图谱中在1 200 ~1 450 cm-具有特征吸收,表明蕲蛇CⅡ中有特征序列Gly-X-Y肽段,存在三股螺旋结构.通过对蕲蛇CⅡ与牛CⅡ进行蛋白质肽段质谱图分析对照后发现,两者具有相似肽段和CⅡ结构特征.以上鉴定表征结果证明采用酶解法提取蛋白为蕲蛇CⅡ,可为蕲蛇药材CⅡ的进一步药理研究提供实验基础.