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该文研究益气解毒方水提物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的抑制作用,并初步探讨其作用机制,为益气解毒方的临床应用提供新的理论依据.用不同质量浓度(0.125,0.25,0.5,1.0 g·L-1)的益气解毒方水提物、阳性对照药(顺铂,4.0 mg·L-1)、抑制剂PD98059(50 μmol·L-1)、激活剂isoproterenol hydrochloride(ISO,20 μmol·L-1)、激活剂ISO+益气解毒方水提物0.5 g·L-1处理CNE2细胞,使用实时无标记细胞功能分析仪(RTCA)和CCK-8法检测细胞增殖活性,并计算出半数抑制浓度(IC50),用荧光双染流式细胞仪PI染色检测药物作用后细胞周期分布情况;Westem blot法检测周期相关蛋白和MAPK/ERK信号通路相关蛋白的表达水平.RTCA和CCK-8法检测结果显示,与正常培养组比较,益气解毒方水提物能够有效抑制CNE2细胞增殖(P<0.01),呈剂量和时间依赖性,48 h IC50为0.5 g·L-1;细胞周期结果显示,水提物处理48 h后,G0/G1期比例降低,G2/M期比例增加,阻滞细胞周期于G2/M期(P <0.01);Western blot实验结果显示,经过不同浓度水提物处理48 h后,细胞周期相关蛋白cyclinD1,cyclinD3,CDK2表达下调,MAPK/ERK信号通路相关蛋白p-c-Raf,p-MEK,p-ERK1/2表达明显下调,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);在此基础上,加入MAPK/ERK信号通路的激活剂和抑

作者:胡晶;戴娜;徐冰雁;周芳亮;蔺婷;罗晶婧;范婧莹;何迎春

来源:中国中药杂志 2018 年 43卷 6期

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作者:
胡晶;戴娜;徐冰雁;周芳亮;蔺婷;罗晶婧;范婧莹;何迎春
来源:
中国中药杂志 2018 年 43卷 6期
标签:
益气解毒方 鼻咽癌 细胞增殖 MAPK/ERK信号通路 Yiqi Jiedu formula nasopharyngeal carcinoma cell proliferation MAPK/ERK signaling pathway
该文研究益气解毒方水提物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的抑制作用,并初步探讨其作用机制,为益气解毒方的临床应用提供新的理论依据.用不同质量浓度(0.125,0.25,0.5,1.0 g·L-1)的益气解毒方水提物、阳性对照药(顺铂,4.0 mg·L-1)、抑制剂PD98059(50 μmol·L-1)、激活剂isoproterenol hydrochloride(ISO,20 μmol·L-1)、激活剂ISO+益气解毒方水提物0.5 g·L-1处理CNE2细胞,使用实时无标记细胞功能分析仪(RTCA)和CCK-8法检测细胞增殖活性,并计算出半数抑制浓度(IC50),用荧光双染流式细胞仪PI染色检测药物作用后细胞周期分布情况;Westem blot法检测周期相关蛋白和MAPK/ERK信号通路相关蛋白的表达水平.RTCA和CCK-8法检测结果显示,与正常培养组比较,益气解毒方水提物能够有效抑制CNE2细胞增殖(P<0.01),呈剂量和时间依赖性,48 h IC50为0.5 g·L-1;细胞周期结果显示,水提物处理48 h后,G0/G1期比例降低,G2/M期比例增加,阻滞细胞周期于G2/M期(P <0.01);Western blot实验结果显示,经过不同浓度水提物处理48 h后,细胞周期相关蛋白cyclinD1,cyclinD3,CDK2表达下调,MAPK/ERK信号通路相关蛋白p-c-Raf,p-MEK,p-ERK1/2表达明显下调,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);在此基础上,加入MAPK/ERK信号通路的激活剂和抑