目的 探讨HBV表面抗原基因启动子Ⅰ DNA结合蛋白1(SBP1)对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因启动子转录的调节作用.方法 利用生物信息学技术确定iNOS基因的启动子区域(iNOSp)和3个缺失突变体的基因序列,PCR分别扩增iNOSp和3个缺失体的基因序列,分别克隆至报告基因表达载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-iNOSp报告载体;以构建的这4种报告质粒分别转染人肝母细胞瘤细胞系HepG2,用ELISA检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性;并与构建的真核表达载体pcDNA3.1(-)-HBV SBP1共转染HepG2细胞系,用ELISA检测CAT的表达活性.结果 成功获得iNOS基因启动子和3个缺失突变体的正确克隆,其中p1-iNOSp和pcDNA3.1(-)-HBV SBP1瞬时共转染HepG2细胞时,iNOS启动子的转录活性上升1.54倍;p3-iNOSp启动子和pcDNA3.1(-)-HBV SBP1瞬时共转染HepG2细胞时,iNOS启动子的转录活性下降31.3
作者:郭风劲;成军;纪冬;刘妍;王琳;张黎颖;宋方洲
来源:中华传染病杂志 2007 年 25卷 5期