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目的 探讨结核分枝杆菌感染对人星形胶质细胞基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响及其机制.方法 分别用结核分枝杆菌(MTB)直接感染人星型胶质细胞系U251细胞,MTB感染外周血单个核细胞(PBMC)后的条件培养基(CoMTB)、含RPMI-1640的MTB条件培养基(CoTB)及未感染MTB的PBMC条件培养基(CoMCON)刺激U251细胞,ELISA检测细胞上清液中MMP-9含量,明胶酶谱法检测MMP-9活性,Western印迹法检测MMP-9、核因子(NF)-кB及核因子-кB抑制蛋白(IкB)α和IкBβ的表达.组间及配对数据比较采用t检验,多组间比较先行方差齐性检验,方差齐采用方差分析,不齐采用秩和检验.结果 MTB直接感染U251细胞后MMP-9几乎检测不到,CoMTB刺激U251细胞后,MMP-9含量从12 h的(400.1±12.6) pg/mL逐步升至72 h的(2900.3±108.4) pg/mL,呈时间依赖性;而CoMCON和CoTB组刺激72 h后MMP-9含量分别为(300.8±40.4) pg/mL和(400.2±42.8) pg/mL,差异有统计学意义(t=9.514,P=0.000;t=9.476,P=0.000).明胶酶谱法和Western印迹法检测CoMTB组上清液中MMP-9的表达,随刺激时间延长,其活性和表达量逐渐增强,与ELISA法一致.CoMTB刺激U251细胞后NF-кB P65表达增加,1h时是CoMCON组的2倍(t=6.78,P=0.041),2h时是CoMCON组的5倍(t=9.23,P=0.008),CoMTB组IкBα和IкBβ蛋

作者:李小鹏;张伦理;丁桂兰;黄呈辉;陈佳丽;刘毅;任卫聪;孙照刚;李传友

来源:中华传染病杂志 2013 年 31卷 5期

知识库介绍

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李小鹏;张伦理;丁桂兰;黄呈辉;陈佳丽;刘毅;任卫聪;孙照刚;李传友
来源:
中华传染病杂志 2013 年 31卷 5期
标签:
分枝杆菌,结核 星形细胞 单核细胞 基质金属蛋白酶类 结核,脑膜 Mycobacterium tuberculosis Astrocytes Monocytes Matrix metalloproteinases Tuberculosis,meningeal
目的 探讨结核分枝杆菌感染对人星形胶质细胞基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响及其机制.方法 分别用结核分枝杆菌(MTB)直接感染人星型胶质细胞系U251细胞,MTB感染外周血单个核细胞(PBMC)后的条件培养基(CoMTB)、含RPMI-1640的MTB条件培养基(CoTB)及未感染MTB的PBMC条件培养基(CoMCON)刺激U251细胞,ELISA检测细胞上清液中MMP-9含量,明胶酶谱法检测MMP-9活性,Western印迹法检测MMP-9、核因子(NF)-кB及核因子-кB抑制蛋白(IкB)α和IкBβ的表达.组间及配对数据比较采用t检验,多组间比较先行方差齐性检验,方差齐采用方差分析,不齐采用秩和检验.结果 MTB直接感染U251细胞后MMP-9几乎检测不到,CoMTB刺激U251细胞后,MMP-9含量从12 h的(400.1±12.6) pg/mL逐步升至72 h的(2900.3±108.4) pg/mL,呈时间依赖性;而CoMCON和CoTB组刺激72 h后MMP-9含量分别为(300.8±40.4) pg/mL和(400.2±42.8) pg/mL,差异有统计学意义(t=9.514,P=0.000;t=9.476,P=0.000).明胶酶谱法和Western印迹法检测CoMTB组上清液中MMP-9的表达,随刺激时间延长,其活性和表达量逐渐增强,与ELISA法一致.CoMTB刺激U251细胞后NF-кB P65表达增加,1h时是CoMCON组的2倍(t=6.78,P=0.041),2h时是CoMCON组的5倍(t=9.23,P=0.008),CoMTB组IкBα和IкBβ蛋