目的 探索创伤弧菌(Vv)感染树突状细胞(DC),经Toll样受体(TLR)2、4途径致DC急性坏死的实验研究.方法 建立Vv1.1758株与DC 2.4混合培养感染模型,用光学显微镜观察细胞感染率,电子显微镜观察Vv定位与细胞结构变化,实时定量反转录PCR测定TLR2、4mRNA表达量,ELISA法检测TNF-α表达量,DNA梯度电泳定性检测细胞凋亡,流式细胞术定量检测细胞凋亡及坏死率.率的比较采用x2检验,多组间数据比较采用方差分析.结果 混合培养0.5、1、2、4、6h时的细胞感染率分别为(7.8±0.8)%、(13.9±1.1)%、(34.6±4.9)%、(77.8±10.2)%和(95.8±13.1)%,混合培养2h后的感染率与培养0.5h相比差异有统计学意义(均P<0.05).细菌定位于DC2.4细胞内侧,2h核染色质明显活跃,核内出现凋亡小体;4h胞质内出现空泡,染色质聚集,胞膜毁损严重;6h线粒体高度肿胀变形,细胞坏死.TLR2、4 mRNA表达于0.5h已达峰值.TNF-α在1h时开始增高(P<0.05),2h达峰值.DNA梯度电泳2h呈冲刷状坏死,4~5 h出现720 bp与900 bp凋亡带.2、4、6h时细胞早期凋亡率分别为(3.1±3.8)%、(7.8±4.7)%和(12.7±8.2)%,显著高于对照组的(0.5±0.7)%(均P<0.05).细胞坏死率分别为(16.7±12.5) %、(41.6±25.9)%和(75.5±33.6)%,显著高于对照组的(2.3±0.8)%(均P<0.
作者:王志刚;吴展;徐水凌;崔戈;阮玲娟
来源:中华传染病杂志 2013 年 31卷 5期