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目的 观察姜黄素衍生物C66对TGF-β刺激的大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原表达的影响及其与大麻素受体(CB)1的关系.方法 体外培养HSC-T6细胞,分为对照组、C66不同浓度组(1、2、5、10和20 μmol/L),细胞计数试剂盒-8检测其吸光度(A)值.选取最佳C66作用浓度及时间,分为对照组、TGF-β干预组、TGF-β+CB1拮抗剂组、TGF-β+-C66干预组、TGF-β-+-CB1拮抗剂+C66联合干预组,分别培养48 h,以蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR检测CB1、α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白及mRNA的表达,以蛋白质印迹法检测磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK)、c-jun氨基末端激酶(JNK)表达水平.多样本均数方差齐性者采用LSD法进行两两比较,方差不齐者采用Dunnett T3检验,组间比较采用单因素方差分析.结果 C66能有效抑制HSC T6增殖,呈现浓度和时间依赖性,其中10 μmol/L C66作用48 h对HSC-T6的抑制效果最明显,抑制率为54%.与对照组相比,单独TGF-β1干预组CB1、Ⅰ型胶原、α-SMA蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(t值分别为6.188、3.48和20.64,均P<0.05).与对照组相比,单独TGF-β1干预组CB1、Ⅰ型胶原、α-SMA mRNA相对表达显著升高,差异均有统计学意义(t值分别为4.705、9.492和38.27,均P<0.05).与对照相组比,TGF-β1

作者:陈泽;陈达之;萧云蕾;肖茜茜;王永林;许烂漫;陈永平

来源:中华传染病杂志 2017 年 35卷 8期

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作者:
陈泽;陈达之;萧云蕾;肖茜茜;王永林;许烂漫;陈永平
来源:
中华传染病杂志 2017 年 35卷 8期
标签:
姜黄素衍生物 肝星状细胞 肝纤维化 c-jun氨基末端激酶 Curcumin derivative Hepatic stellate cell Liver fibrosis c-Jun N-terminal kinase
目的 观察姜黄素衍生物C66对TGF-β刺激的大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原表达的影响及其与大麻素受体(CB)1的关系.方法 体外培养HSC-T6细胞,分为对照组、C66不同浓度组(1、2、5、10和20 μmol/L),细胞计数试剂盒-8检测其吸光度(A)值.选取最佳C66作用浓度及时间,分为对照组、TGF-β干预组、TGF-β+CB1拮抗剂组、TGF-β+-C66干预组、TGF-β-+-CB1拮抗剂+C66联合干预组,分别培养48 h,以蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR检测CB1、α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白及mRNA的表达,以蛋白质印迹法检测磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK)、c-jun氨基末端激酶(JNK)表达水平.多样本均数方差齐性者采用LSD法进行两两比较,方差不齐者采用Dunnett T3检验,组间比较采用单因素方差分析.结果 C66能有效抑制HSC T6增殖,呈现浓度和时间依赖性,其中10 μmol/L C66作用48 h对HSC-T6的抑制效果最明显,抑制率为54%.与对照组相比,单独TGF-β1干预组CB1、Ⅰ型胶原、α-SMA蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(t值分别为6.188、3.48和20.64,均P<0.05).与对照组相比,单独TGF-β1干预组CB1、Ⅰ型胶原、α-SMA mRNA相对表达显著升高,差异均有统计学意义(t值分别为4.705、9.492和38.27,均P<0.05).与对照相组比,TGF-β1