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目的用基因转染技术使人关节软骨细胞(HACs)向永生化转化,通过诱导使永生化软骨细胞的表型得到维持. 方法利用编码人类乳头瘤病毒16型E7基因片段(HPV16E7)的逆转录病毒表达载体pLXSN转染HACs,挑取转化细胞克隆并扩大增殖,继用核型分析、克隆形成实验、裸鼠致瘤实验检测转化特性.Nutridoma-sp及抗坏血酸盐无血清诱导培养基诱导并维持转化软骨细胞的Ⅱ型胶原表型. 结果 HACs 被HPV16E7成功转化,目前传代已达50代,转化的HACs为良性转化,诱导培养基能够使转化软骨细胞的Ⅱ型胶原合成增加并维持在正常水平. 结论 HPV16E7能够使HACs良性转化并长期培养,经诱导后转化软骨细胞的Ⅱ型胶原表型能够得到很好维持.

作者:何清义;李起鸿;许建中;杨柳

来源:中华创伤杂志 2002 年 18卷 12期

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作者:
何清义;李起鸿;许建中;杨柳
来源:
中华创伤杂志 2002 年 18卷 12期
标签:
软骨细胞 基因转染 表型 组织工程
目的用基因转染技术使人关节软骨细胞(HACs)向永生化转化,通过诱导使永生化软骨细胞的表型得到维持. 方法利用编码人类乳头瘤病毒16型E7基因片段(HPV16E7)的逆转录病毒表达载体pLXSN转染HACs,挑取转化细胞克隆并扩大增殖,继用核型分析、克隆形成实验、裸鼠致瘤实验检测转化特性.Nutridoma-sp及抗坏血酸盐无血清诱导培养基诱导并维持转化软骨细胞的Ⅱ型胶原表型. 结果 HACs 被HPV16E7成功转化,目前传代已达50代,转化的HACs为良性转化,诱导培养基能够使转化软骨细胞的Ⅱ型胶原合成增加并维持在正常水平. 结论 HPV16E7能够使HACs良性转化并长期培养,经诱导后转化软骨细胞的Ⅱ型胶原表型能够得到很好维持.