目的构建骨形态发生蛋白-2( BMP-2)真核表达质粒,使其在人骨髓基质干细胞( hBMSCs)中表达,并观察表达产物的诱导成骨活性.方法在脂质体介导下将 BMP-2基因导入 hBMSCs,流式细胞仪、 ALP检测和 VEGF探针原位杂交分析其对细胞增殖、 ALP活性和 VEGF表达的影响.并利用转染后的培养液上清诱导小鼠成纤维细胞( L929),检测其骨钙素、Ⅱ型胶原表达.结果转染后细胞稳定表达 BMP-2基因, S期细胞比例增多, ALP活性和 VEGF的表达明显增加.且诱导 L929细胞骨钙素、Ⅱ型胶原阳性表达.结论 BMP-2重组质粒转染 hBMSCs后表达目的蛋白,促进自身增殖、分化和上调 VEGF的表达,并诱导成纤维细胞向成骨细胞转化,为 BMP-2基因治疗奠定了实验基础.
作者:李建军;韩东;刘建国;孙鸿斌;王宏;王玲;徐莘香
来源:中华创伤骨科杂志 2004 年 6卷 2期