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目的 研究在大肠杆菌中高效表达人促黄体激素释放素-血管生成素(luteinizing hormone releasing hormone-angiogenin,LHRH-Ang)重组毒素及其复性的方法.方法 利用分子生物学技术构建pET28a/LHRH-Ang表达载体,序列测定验证融合基因的正确性.将测序正确的质粒转化在大肠杆菌BL21(DE3)中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-Thiogalactoside,IPTG)诱导观察重组毒素的表达.采用梯度透析法对以包涵体形式表达的重组毒素进行复性研究.结果 利用基因工程技术,成功构建了表达LHRH-PⅡ-Ang重组毒素的原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导,重组毒素以包涵体的形式获得了表达,其表达量占菌体蛋白总量的18.43

作者:倪志立;张秋航;曲秋懿;吕海丽;范舒雅;蔡超

来源:中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2010 年 45卷 8期

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作者:
倪志立;张秋航;曲秋懿;吕海丽;范舒雅;蔡超
来源:
中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2010 年 45卷 8期
标签:
促黄体素释放激素 血管生成素类 免疫毒素类 大肠杆菌 Gonadotropin-releasing hormone Angiopoientins Immunotoxins Escherichia coli
目的 研究在大肠杆菌中高效表达人促黄体激素释放素-血管生成素(luteinizing hormone releasing hormone-angiogenin,LHRH-Ang)重组毒素及其复性的方法.方法 利用分子生物学技术构建pET28a/LHRH-Ang表达载体,序列测定验证融合基因的正确性.将测序正确的质粒转化在大肠杆菌BL21(DE3)中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-Thiogalactoside,IPTG)诱导观察重组毒素的表达.采用梯度透析法对以包涵体形式表达的重组毒素进行复性研究.结果 利用基因工程技术,成功构建了表达LHRH-PⅡ-Ang重组毒素的原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导,重组毒素以包涵体的形式获得了表达,其表达量占菌体蛋白总量的18.43