目的 探讨微小RNA(microRNA,rniR)-15a/16-1重组慢病毒对人鼻咽癌CNE-2Z细胞生物特性的影响,并探讨其可能机制.方法 重组慢病毒和空载体慢病毒转染CNE-2Z细胞后筛选绿色荧光蛋白阳性细胞,实时定量PCR (RT-qPCR)检测miR-15a、miR-16-1表达水平;将实验分为对照组、转染组、放射线照射组、转染联合放射线照射组,四甲基偶氮唑蓝法分析各组细胞增殖情况;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;克隆形成实验分析对照组和转染组对放射线敏感性的变化;RT-qPCR、Western blot法检测bcl-2 mRNA及其蛋白的表达水平;分光光度法检测Caspase-2、Caspase-3的活化程度.结果 转染组miR-15a、miR-16-1相对表达量((x)±s,下同)分别为524.80±40.79、466.11±40.96,同对照组比较,差异有统计学意义(t=494.611,t=386.840,P=0.000);转染联合放射线照射组细胞增殖抑制最明显(F =424.255,P=0.000).对照组、转染组、放射线照射组及转染联合放射线照射组的细胞凋亡率分别为(2.2±1.4)%、(9.6±0.8)%、(2.9±1.1)%、(18.6±0.7)%,差异有统计学意义(F=158.519,P=0.000).转染组同等剂量下(2、4、6、8 Gy)存活分数、平均致死剂量(mean lethal dose,Do)、准阈剂量(quasi-threshold dose,Dq)均低于对照组.二者放射增强比(sensitization
作者:张春鸿;方潇碧;李文峰;施清圆;吴丽萍;陈晓云;黄振校;武鹏;王珍珍
来源:中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2013 年 48卷 5期