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目的 研究以腺病毒为载体的白细胞介素24(IL-24)基因(简称AdVIL-24)过表达对人CNE-2Z鼻咽癌细胞体内外放疗的抑癌增效作用及潜在的作用机制.方法 将AdVIL-24感染CNE-2Z细胞,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法及Western blot法检测IL-24在CNE-2Z细胞中的转录和表达.体外实验:将PBS组、AdV组、AdVIL-24组、放疗组及AdVIL-24联合放疗组的CNE-2Z细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CNE-2Z细胞的生长情况;碘化丙啶(PI)染色检测细胞周期,Annexin-V-PE/7-AAD染色检测CNE-2Z细胞凋亡率的变化;RT-PCR检测CNE-2Z细胞中P21、P27、cyclin E、CDK2、Bcl-2、Bax的转录;Western blot检测CNE-2Z细胞中P21、P27、cyclin E、CDK2、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达.体内实验:采用CNE-2Z细胞株建立人鼻咽癌裸鼠模型,然后将各组荷瘤裸鼠瘤体进行相应处理,动态测量肿瘤体积及最后取瘤称量重量;免疫组化检测P21、P27、cyclin E、CDK2、Bcl-2、Bax、Caspase-3、CD34、VEGF等因子的表达以及微脉管密度.采用金正均法(Q值)计算联合用药后的最终效应.结果 体外实验:AdVIL-24联合放疗组能使CNE-2Z细胞生长出现抑制(P<0.05,Q3d=0.916,Q4d=1.050);G1期阻滞(50.37%,P<0.05,Q=1.042);并诱导其凋亡(48.82%,P<0.05,Q=1.042);能明显上调

作者:孙朋;杨吉成;谢宇锋;盛伟华;刘济生

来源:中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2013 年 48卷 11期

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作者:
孙朋;杨吉成;谢宇锋;盛伟华;刘济生
来源:
中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2013 年 48卷 11期
标签:
鼻咽肿瘤 白细胞介素类 基因疗法 放射疗法 细胞系,肿瘤 Nasopharyngeal neoplasms Interleukins Gene therapy Radiotherapy Cell line,tumor
目的 研究以腺病毒为载体的白细胞介素24(IL-24)基因(简称AdVIL-24)过表达对人CNE-2Z鼻咽癌细胞体内外放疗的抑癌增效作用及潜在的作用机制.方法 将AdVIL-24感染CNE-2Z细胞,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法及Western blot法检测IL-24在CNE-2Z细胞中的转录和表达.体外实验:将PBS组、AdV组、AdVIL-24组、放疗组及AdVIL-24联合放疗组的CNE-2Z细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CNE-2Z细胞的生长情况;碘化丙啶(PI)染色检测细胞周期,Annexin-V-PE/7-AAD染色检测CNE-2Z细胞凋亡率的变化;RT-PCR检测CNE-2Z细胞中P21、P27、cyclin E、CDK2、Bcl-2、Bax的转录;Western blot检测CNE-2Z细胞中P21、P27、cyclin E、CDK2、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达.体内实验:采用CNE-2Z细胞株建立人鼻咽癌裸鼠模型,然后将各组荷瘤裸鼠瘤体进行相应处理,动态测量肿瘤体积及最后取瘤称量重量;免疫组化检测P21、P27、cyclin E、CDK2、Bcl-2、Bax、Caspase-3、CD34、VEGF等因子的表达以及微脉管密度.采用金正均法(Q值)计算联合用药后的最终效应.结果 体外实验:AdVIL-24联合放疗组能使CNE-2Z细胞生长出现抑制(P<0.05,Q3d=0.916,Q4d=1.050);G1期阻滞(50.37%,P<0.05,Q=1.042);并诱导其凋亡(48.82%,P<0.05,Q=1.042);能明显上调