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目的 探讨整合素β3受体信号途径在结缔组织生长因子(CTGF)促进肺动脉平滑肌细胞增殖、迁移和细胞外基质基因表达中的作用机制研究.方法 分离并培养SD大鼠肺动脉中膜平滑肌细胞,实验使用第3~7代细胞;细胞分为3组:(1)空白组:不加任何刺激因子;(2)CTGF组:培养体系中加入CTGF(50 ng/ml);(3)CTGF+整合素β3抗体组:培养体系中加入CTGF(50ng/ml)及整合素β3抗体(10 mg/L).以上3组细胞中加入CTGF (50 ng/ml)和浓度分别为0、5、10、15、20mg/L的整合素β3抗体,共同孵育24、48、72及96 h,采用WST-1细胞增殖试剂检测细胞增殖的变化;应用Transwell方法在相差显微镜下观察细胞迁移数目的变化;应用荧光定量RT-PCR检测Ⅰ型胶原α1、Ⅲ型胶原α1和纤维连接蛋白1 mRNA表达;应用Western blot和免疫组化检测纤维连接蛋白表达.结果 整合素β3抗体对CTGF促肺动脉平滑肌细胞增殖有明显抑制作用(P<0.05),其中整合素β3抗体浓度为10 mg/L时抑制率最高.CTGF组肺动脉平滑肌细胞迁移数目(25.00±1.57)个,较空白组(11.00±2.08)个多(P<0.01);CTGF+整合素β3抗体组肺动脉平滑肌细胞迁移数目( 17.00±4.16)个,较CTGF组少(P<0.05);与对照组比较,CTGF组肺动脉平滑肌细胞Ⅰ型胶原α1(4.28±0.33)、Ⅲ型胶原α1(4.41±0.35)和

作者:李刚;胡煜;贾鹏;付杰;卢翠侠;孙玉琴;刘斌

来源:中华儿科杂志 2011 年 49卷 12期

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作者:
李刚;胡煜;贾鹏;付杰;卢翠侠;孙玉琴;刘斌
来源:
中华儿科杂志 2011 年 49卷 12期
标签:
整合素β3 结缔组织生长因子 细胞外基质 高血压,肺性 细胞增殖 细胞迁移 Integrin beta3 Connective tissue growth factor Extracellular matrix Hypertension,pulmonary Cell proliferation Cell migration
目的 探讨整合素β3受体信号途径在结缔组织生长因子(CTGF)促进肺动脉平滑肌细胞增殖、迁移和细胞外基质基因表达中的作用机制研究.方法 分离并培养SD大鼠肺动脉中膜平滑肌细胞,实验使用第3~7代细胞;细胞分为3组:(1)空白组:不加任何刺激因子;(2)CTGF组:培养体系中加入CTGF(50 ng/ml);(3)CTGF+整合素β3抗体组:培养体系中加入CTGF(50ng/ml)及整合素β3抗体(10 mg/L).以上3组细胞中加入CTGF (50 ng/ml)和浓度分别为0、5、10、15、20mg/L的整合素β3抗体,共同孵育24、48、72及96 h,采用WST-1细胞增殖试剂检测细胞增殖的变化;应用Transwell方法在相差显微镜下观察细胞迁移数目的变化;应用荧光定量RT-PCR检测Ⅰ型胶原α1、Ⅲ型胶原α1和纤维连接蛋白1 mRNA表达;应用Western blot和免疫组化检测纤维连接蛋白表达.结果 整合素β3抗体对CTGF促肺动脉平滑肌细胞增殖有明显抑制作用(P<0.05),其中整合素β3抗体浓度为10 mg/L时抑制率最高.CTGF组肺动脉平滑肌细胞迁移数目(25.00±1.57)个,较空白组(11.00±2.08)个多(P<0.01);CTGF+整合素β3抗体组肺动脉平滑肌细胞迁移数目( 17.00±4.16)个,较CTGF组少(P<0.05);与对照组比较,CTGF组肺动脉平滑肌细胞Ⅰ型胶原α1(4.28±0.33)、Ⅲ型胶原α1(4.41±0.35)和