目的 建立卵巢子宫内膜异位症(内异症)病灶微血管内皮细胞( OEMEC)的体外培养体系并进行鉴定.方法 采用Ⅰ型和Ⅱ型胶原酶、胰蛋白酶一乙二胺四乙酸(EDTA)联合消化法,分离卵巢内异症患者术后病理检查确诊的囊肿组织中的OEMEC,经差速贴壁法和杂细胞擦刮法纯化;采用免疫细胞化学染色法染色,通过光镜、透射电镜观察微血管内皮细胞特异性标志物——CD34、第八因子多克隆抗体(FⅧ-Rag)和微血管内皮细胞特异性结构——Weibel-Palade小体的表达,对所获得的OEMEC进行鉴定.结果 光镜下观察OEMEC呈现典型的铺路石样生长;免疫细胞化学染色显示有CD34和FⅧ-Rag的强表达,其阳性细胞的百分率分别为91.4%和92.5%;透射电镜下观察OEMEC内可见Weibel-Palade小体的存在;培养的子代微血管内皮细胞生长良好,细胞群体倍增时间为4.5d.结论 OEMEC体外培养体系的成功建立,对了解人OEMEC的异质性具有较好的实用价值,将为内异症病灶中新生微血管特点的研究奠定细胞学实验基础.
作者:欧阳卓;卢丹;张为远
来源:中华妇产科杂志 2011 年 46卷 10期