目的 研究百日咳毒素(PTX)对G蛋白偶联ER(GPER)介导的雌激素激活的子宫内膜癌细胞系Ishikawa和HEC-1A细胞中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响.方法 采用免疫组化SP法检测Ishikawa和HEC-1A细胞中GPER蛋白的表达.将不同浓度(0、0.1、0.5、1.0 μg/ml)的PTX分别处理Ishikawa和HEC-1A细胞30 min后,再予上述浓度的PTX分别联合17β雌二醇(17β-E2；1×10-6molL)共同处理HEC-1A细胞15 min、Ishikawa细胞30 min,采用蛋白印迹法检测Ishikawa和HEC-1A细胞中GPER、ERα、ERβ蛋白的表达及Akt的活化状态[Akt的活化状态以磷酸化Akt(p-Akt)/Akt表示].结果(1)免疫组化法检测显示,在Ishikawa和HEC-1A细胞中GPER蛋白均在细胞质中呈棕黄色阳性表达.(2)蛋白印迹法检测显示,不同浓度(0、0.1、0.5、1.0μg/ml)的PTX联合17β-E2(1×10-6 mol/L)处理后,在Ishikawa细胞中,p-Akt/Akt分别为0.74±0.54、0.34 ±0.06、0.18±0.03、0.07±0.15,GPER蛋白的表达水平分别为0.872±0.490、0.395 ±0.054、0.145 ±0.014、0.034±0.008,随着PTX浓度的增加,p-Akt/Akt、GPER蛋白的表达水平均明显下降(P＜0.05),且当PTX浓度为1.0μg/ml时下降最显著(F=63.729,P=0.0001;F ＝160.284,P=0.0001)；而ERα和ERβ蛋白的表达水平

作者：郭瑞霞；雷佳；王新燕；葛新；胡冬梅；马秀英；李留霞；乔玉环

来源：中华妇产科杂志 2013 年 48卷 2期