目的:研究抗菌肽LL-37通过促进阴道上皮细胞免疫因子的分泌抑制假丝酵母菌的作用。方法(1)构建LL-37原核表达载体pET-Duet/LL-37并在大肠埃希菌M15中诱导表达。对所表达的LL-37融合蛋白进行纯化及鉴定,并用K-B纸片法初步验证LL-37纯化蛋白的抗真菌活性。(2)纯化的LL-37蛋白加入到与假丝酵母菌共培养的人阴道上皮细胞[即外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)阴道上皮细胞模型]中,并分为实验组与对照组(不加LL-37纯化蛋白),采用葡萄糖消耗法观察抑菌效果[以吸光度(A)值表示]。采用ELISA方法检测不同时间点干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)水平及IFN-γ/IL-10比值的变化。结果(1)诱导表达的LL-37融合蛋白的浓度为433.92μg/ml,纯度达96
作者:霍彦;王芳;孙蓓;尹利荣;张萍萍;张钰娟;张步美
来源:中华妇产科杂志 2016 年 2期