目的：探讨AT丰富结合域1A（ARID1A）基因表达下调对卵巢透明细胞癌细胞系ES2细胞生物学功能的影响。方法（1）设计3对ARID1A基因小分子干扰RNA（siRNA）序列，分别命名为siN1（即ARID1A-705）、siN2（即ARID1A-1513）、siN3（即ARID1A-2282），以及1对与ARID1A基因无关（阴性对照）的siRNA序列。分别采用逆转录（RT）-PCR技术和蛋白质印迹（western blot）法检测3种不同的ARID1A基因siRNA瞬时转染后ES2细胞中ARID1A mRNA和蛋白的表达水平，选择最佳沉默效应的siRNA干扰片段（即siN3）用于后续实验。（2）实验分为3组，即siN3转染组、阴性对照组和空白对照组，采用活细胞计数（CCK-8）法检测转染不同时间（6、24、48、72、96 h）后3组细胞的增殖活性，以吸光度（A）值表示；流式细胞仪检测转染后3组细胞的凋亡情况；体外侵袭实验检测转染后3组细胞的侵袭能力；western blot法检测转染后ES2细胞中核因子κB（NF-κB）、膜型基质金属蛋白酶1（MT1-MMP）及基质金属蛋白酶2（MMP2）蛋白的表达水平。结果（1）RT-PCR技术检测显示，siN1、siN2、siN3瞬时转染后ES2细胞中ARID1A mRNA的表达水平分别为0.0078±0.0057、0.0068±0.0003、0.0028±0.0003，均明显低于阴性对照（0.0346±0.0013；P均<0.01）；western

作者：吕昌帅；张英兰；郎景和

来源：中华妇产科杂志 2016 年 51卷 3期