目的:探讨Notch基因的配体——Jagged1 mRNA在卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织中的表达及沉默Jagged1基因的表达对卵巢癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法(1)收集2011年2月至2014年3月在河南省新乡市中心医院行手术治疗的48例卵巢癌及30例良性卵巢上皮性肿瘤患者的存档组织标本,采用实时荧光定量逆转录(RT)-PCR技术检测肿瘤组织中Jagged1、Notch受体——Notch1及其下游靶基因Hes1、Hey1 mRNA的表达。(2)培养卵巢浆液性囊腺癌细胞系SKOV3细胞接种于裸鼠腋窝皮下,构建卵巢癌裸鼠移植瘤模型,随机将裸鼠分为3组,Jagged1干扰组、空载体组和对照组,每组10只裸鼠,分别转染重组载体pcDNA3.1(+)-siRNA-Jagged1质粒(特异性沉默Jagged1基因的表达)、空载体pDC3.1质粒和磷酸盐缓冲液。转染结束后14 d,测量3组裸鼠移植瘤体积和瘤体质量,计算抑瘤率;采用实时荧光定量RT-PCR技术和蛋白印迹(western blot)法分别检测裸鼠移植瘤组织中Jagged1、Notch1、Hes1和Hey1 mRNA和蛋白的表达。结果(1)实时荧光定量RT-PCR技术检测显示,卵巢癌组织中Jagged1、Notch1、Hes1和Hey1 mRNA的表达水平均高于良性卵巢上皮性肿瘤组织,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。(2)转染结束后14 d,Jagged1干扰组裸鼠的移植
作者:刘国燕;郜智慧;李力;宋亭亭;盛修贵
来源:中华妇产科杂志 2016 年 51卷 6期