目的 探讨抑制1-磷酸鞘氨醇受体2(S1PR2)对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞增殖能力的影响及其作用机制.方法(1)设计针对S1PR2基因的小分子干扰RNA(siRNA,命名为si-S1PR2),以及与S1PR2基因无关的siRNA(作为阴性对照);以卵巢癌细胞系SKOV3细胞作为研究对象,实验分为3组,分别为si-S1PR2转染组、阴性对照组和空白对照组,采用蛋白印迹(western blot)法检测3组SKOV3细胞中S1PR2蛋白的表达.(2)体外实验:分组同前,采用活细胞计数(CCK-8)法检测转染后不同时间点(分别为24、48、72 h)3组SKOV3细胞增殖的抑制率;流式细胞仪检测转染后3组SKOV3细胞的细胞周期比例;western blot法检测转染后3组SKOV3细胞中磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达水平.(3)体内实验:将SKOV3细胞接种于裸鼠腹腔,构建卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型.实验分为两组,分别为S1PR2抑制剂组和对照组(每组8只裸鼠),两组裸鼠在腹腔接种SKOV3细胞后7 d开始腹腔给药,分别给予S1PR2抑制剂——JTE-013和磷酸盐缓冲液(PBS),每周2次共8次.28 d后处死并解剖两组裸鼠,观察腹腔移植瘤的生长情况.结果(1)western blot法检测显示,si-S1PR2转染组SKOV3细胞中S1PR2蛋白的表达水平为0.24±0.04,与阴性对照组(1.07± 0.13)、空白对照组(1.10±0.14)分别比较,差异均
作者:戴岚;刘艺璇;谢蕾;狄文
来源:中华妇产科杂志 2018 年 53卷 2期