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目的 探讨幼年类风湿关节炎(JRA)血清对成熟小鼠树突状细胞(DCs)白三烯B4(LTB4)及其受体2(BLT2)信号通路(LTB4-BLT2)的影响.方法 分离正常小鼠骨髓细胞,体外用细胞因子重组小鼠白细胞介素4[(rmIL-4),重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落因子(rmGM-CSF)]诱导、分化培养成幼稚DCs,细菌脂多糖(LPS)刺激其成熟.光学显微镜观察其形态,流式细胞术对其进行鉴定;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定树突状细胞分化成熟过程中培养上清、正常血清组、JRA活动期血清组和BLT2阻断剂(LY255283)作用组中LTB4含量;免疫细胞化学方法和免疫荧光抗体法检测成熟DCs BLT2的定位表达、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测其mRNA表达;流式细胞术检测正常血清组、JRA活动期血清组和BLT2阻断剂作用于成熟DCs 18 h后BLT2的表达.结果 成熟DCs存在LTB4-BLT2信号通路表达;DCs不仅存在BLT2的基因mRNA表达,而且存在蛋白表达,蛋白表达于DCs细胞膜和胞质,以胞质细胞器表达最强;正常血清组、JRA活动期血清组、BLT2阻断剂组作用于成熟DC 18 h前后LTB4含量分别为(17±3)pg/ml、(82±20)pg/ml、(82±20)pg/ml和(24±6)pg/ml、(115±20)pg/ml、(91±11)pg/ml,JRA活动期血清组与正常血清组比较LTB4含量明显增高(P<0.01),BLT2阻断剂组与JRA活动期血清组比较LTB4含

作者:杨杨;陈新胜;田凡清;尚桂莲;王宏伟

来源:中华风湿病学杂志 2008 年 12卷 6期

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杨杨;陈新胜;田凡清;尚桂莲;王宏伟
来源:
中华风湿病学杂志 2008 年 12卷 6期
标签:
树突细胞 受体,白三烯B4 关节炎,幼年型类风湿 Dendritic cells Receptors,leukotriene B4 Arthritis,juvenile rheumatoid
目的 探讨幼年类风湿关节炎(JRA)血清对成熟小鼠树突状细胞(DCs)白三烯B4(LTB4)及其受体2(BLT2)信号通路(LTB4-BLT2)的影响.方法 分离正常小鼠骨髓细胞,体外用细胞因子重组小鼠白细胞介素4[(rmIL-4),重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落因子(rmGM-CSF)]诱导、分化培养成幼稚DCs,细菌脂多糖(LPS)刺激其成熟.光学显微镜观察其形态,流式细胞术对其进行鉴定;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定树突状细胞分化成熟过程中培养上清、正常血清组、JRA活动期血清组和BLT2阻断剂(LY255283)作用组中LTB4含量;免疫细胞化学方法和免疫荧光抗体法检测成熟DCs BLT2的定位表达、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测其mRNA表达;流式细胞术检测正常血清组、JRA活动期血清组和BLT2阻断剂作用于成熟DCs 18 h后BLT2的表达.结果 成熟DCs存在LTB4-BLT2信号通路表达;DCs不仅存在BLT2的基因mRNA表达,而且存在蛋白表达,蛋白表达于DCs细胞膜和胞质,以胞质细胞器表达最强;正常血清组、JRA活动期血清组、BLT2阻断剂组作用于成熟DC 18 h前后LTB4含量分别为(17±3)pg/ml、(82±20)pg/ml、(82±20)pg/ml和(24±6)pg/ml、(115±20)pg/ml、(91±11)pg/ml,JRA活动期血清组与正常血清组比较LTB4含量明显增高(P<0.01),BLT2阻断剂组与JRA活动期血清组比较LTB4含