目的 初步探讨促分裂原活化的蛋白激酶/胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)信号通路在Sonic Hedgehog (Shh)调控RA成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)增殖中的作用.方法 收集病情活动(DAS28≥3.2)的RA患者经关节镜下滑膜清理术或关节置换术切除的滑膜组织,组织块培养法培养分离RA-FLS,分别予Shh激动剂purmorphamine、抑制剂cyclopamine及MAPK/ERK信号通路抑制剂U0126处理,采用蛋白质印迹法检测RA-FLS细胞MAPK/ERK信号通路关键蛋白phospho ERK1/2(p-ERK1/2)磷酸化水平,细胞增殖与毒性试剂盒(CCK8)检测细胞增殖活力,以及流式细胞术检测细胞增殖情况,采用单因素方差分析和Kruskal-Wallis H (K)方法对数据进行分析.结果 与对照组相比,浓度为1μmol/L的purmorphmine可短时间内引起p-ERK1/2蛋白表达增加,作用15 min时显著(P<0.01),经U0126和cyclopamine处理后,p-ERK1/2蛋白表达明显下降(P<0.01).RA-FLS经purmorphmine(1μmol/L)处理后,细胞增殖活力为(114±5)%,明显高于对照组(100±0)%(P<0.01),purmorphmine(1μmol/L)组S期细胞占(8.39±0.60)%,较对照组(3.29±0.69)%明显增加(P<0.01);经cyclopamine(10 μmol/L)处理后,细胞增殖活力为(89±1)%(P<0.05),S期细胞占(1.53±0.22)%(P<0.05);经purmorphamine(1μmol/L)
作者:刘芳;朱尚玲;冯晓雪;罗敏琪;张白玉;李朝霞;王晓红;潘云峰;黄建林
来源:中华风湿病学杂志 2017 年 21卷 5期