目的 探讨干扰小RNA(siRNA)沉默α1抗胰蛋白酶(α1-AT)基因对类风湿关节炎成纤维样滑膜(RA-SFs)生物学行为的影响.方法 取5例RA患者的膝关节滑膜组织原代培养,采用人工合成的沉默α 1-AT siRNA,特异性抑制α1-AT在RA-SFs中的表达;瞬时转染24、36 h后,采用RT-qPCR法检测抑制效率,同时检测α1-AT基因沉默后各相关基因的表达;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、Transwell小室、细胞划痕、ELISA等方法检测干扰α1-AT表达后对细胞增殖、侵袭、迁移的影响和IL-17,TNF-α,IL-1α,IL-1β等相关炎性因子分泌的表达;观察通路抑制剂[ERK抑制剂、信号转导和转录激活因子3(STAT3)抑制剂、NF-κB抑制剂]刺激细胞时,对α1-AT的影响变化.多组间比较采用单因素方差分析,LSD-t检验及x2检验.结果 与阴性对照组相比,siRNAα1-AT组转染24 h时,α1-AT mRNA水平抑制效果显著(P＜0.05),且RA SFs的增殖速率未受影响(P＞0.05),细胞的侵袭和迁移能力显著下降(P＜0.05);IL-17、IL-1β分泌略微降低(P＞0.05),TNF-α和IL-1α分泌略微增加(P＞0.05);α1-AT下游基因MMP-2-169、Hu-Bax1、MMP-9、Hu Bax和Hu Bcl-xl表达均明显下降(P＜0.05).信号通路抑制剂ERK抑制剂(PD98059)和NF-κB抑制剂(PDTC)对α1-AT均有显著性影响(P＜0.05).结论 α1-AT基因

作者：赵燕；曹盛楠；孙国栋；潘继红；常晓天；孟庆松

来源：中华风湿病学杂志 2019 年 23卷 9期