目的:探讨氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)对RA患者成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖及炎性因子mRNA表达的影响。方法:采用组织块贴壁法分离培养RA-FLS,4~6代细胞用于后续实验。不同浓度的人Ox-LDL刺激RA-FLS 24 h,MTS实验检测细胞增殖情况,实时(RT)-PCR法检测炎性因子IL-6、TGF-β、IL-8、TNF-α及清道夫受体CD36、结合磷脂酰丝氨酸和氧化脂蛋白的清道夫受体(SR-PSOX)mRNA表达水平。siRNA特异性敲减SR-PSOX,RT-PCR法检测敲减效果,同时验证SR-PSOX基因敲减后各相关基因的表达。统计学分析采用
t检验,
F检验。
结果:不同浓度Ox-LDL(10、25、50 μg/ml)可明显促进RA-FLS的增殖,其吸光度(
A)值(490 nm)分别为:(1.04±0.15)、(1.05±0.14)、(1.00±0.10),均高于对照组(0.81±0.04),差异有统计学意义(
F=4.737,
P<0.01)。在炎性因子mRNA表达方面,与对照组相比较,50 μg/ml和100 μg/ml Ox-LDL可显著促进IL-6 mRNA的表达(
F=14.709,
P<0.01);不同浓度Ox-LDL均可抑制RA-FLS中TGF-β mRNA的表达(
F=299.074,
P<0.01),而对IL-8、TNF-α mRNA的表达无明显影响。进一步的机制探讨发现Ox-LDL可促进RA-FLS高表达SR-PS
作者:麻贞贞;建磊磊;王欣宇;于若寒;赵金霞;刘湘源;李常虹
来源:中华风湿病学杂志 2020 年 24卷 2期