目的 分离和鉴定IRM-2小鼠辐射抗性相关基因.方法 采用SMART技术构建IRM-2小鼠全长cDNA文库,提取雄性IRM-2小鼠脾脏总RNA,以此为模板,通过逆转录酶PowerScript反转录合成第1链cDNA,通过长距离PCR合成并扩增双链cDNA.该扩增产物经纯化、Sfi I酶切、去除小于500 bp片段后,将cDNA连接到sfi I消化过的PDNR-LIB质粒载体中,用电转化法将重组质粒转化到大肠杆菌DH5α,得到IRM-2小鼠cDNA原始文库并用PCR法对文库的质量进行鉴定.随机从cDNA文库挑选130个阳性克隆进行测序,与GenBank基因库进行同源性比较.结果 构建的cDNA文库的容量为2.25×106个克隆,重组率达95
作者:王芹;李进;宋力;刘强;岳井银;穆传杰;唐卫生;樊飞跃
来源:中华放射医学与防护杂志 2010 年 30卷 3期