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目的 探讨下调NEK-2表达对非小细胞型肺癌A549细胞放射敏感性影响.方法 培养人非小细胞型肺癌A549细胞,通过siRNA技术沉默A549细胞中NEK-2的表达水平,通过蛋白印迹法实验进行验证.采用克隆形成实验检测放射增敏作用,用流式细胞技术检测下调NEK-2表达对辐射诱导A549细胞凋亡和周期的影响,采用免疫荧光实验检测DNA双链断裂和修复情况.结果 NEK-2 siRNA可明显下调A549细胞中NEK-2的表达水平.相对于空白对照组和阴性对照组,下调NEK-2表达能抑制肿瘤细胞的增殖能力,提高A549细胞的放射敏感性,平均致死剂量由1.80 Gy下降至1.40 Gy,放射增敏比值为1.32.下调NEK-2表达可提高因辐射诱导引起的凋亡水平(7.85%~17.17%),使细胞在G2/M期阻滞(9.23%~30.16%),使DNA双链断裂的数量增加至165%,使DNA双链损伤的修复效率下降至48%.结论 下调A549细胞中NEK-2表达水平能降低细胞的增殖能力,提高细胞放射敏感性,其作用机制可能与细胞周期变化、细胞凋亡以及DNA双链的断裂与修复有关.

作者:陈成龙;彭逸茹;张楠;薛莲;于冬

来源:中华放射肿瘤学杂志 2019 年 28卷 2期

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作者:
陈成龙;彭逸茹;张楠;薛莲;于冬
来源:
中华放射肿瘤学杂志 2019 年 28卷 2期
标签:
细胞增殖 凋亡 细胞周期 DNA修复 放射增敏 Cell proliferation Apoptosis Cell cycle DNA repair Radiotherapy sensitization
目的 探讨下调NEK-2表达对非小细胞型肺癌A549细胞放射敏感性影响.方法 培养人非小细胞型肺癌A549细胞,通过siRNA技术沉默A549细胞中NEK-2的表达水平,通过蛋白印迹法实验进行验证.采用克隆形成实验检测放射增敏作用,用流式细胞技术检测下调NEK-2表达对辐射诱导A549细胞凋亡和周期的影响,采用免疫荧光实验检测DNA双链断裂和修复情况.结果 NEK-2 siRNA可明显下调A549细胞中NEK-2的表达水平.相对于空白对照组和阴性对照组,下调NEK-2表达能抑制肿瘤细胞的增殖能力,提高A549细胞的放射敏感性,平均致死剂量由1.80 Gy下降至1.40 Gy,放射增敏比值为1.32.下调NEK-2表达可提高因辐射诱导引起的凋亡水平(7.85%~17.17%),使细胞在G2/M期阻滞(9.23%~30.16%),使DNA双链断裂的数量增加至165%,使DNA双链损伤的修复效率下降至48%.结论 下调A549细胞中NEK-2表达水平能降低细胞的增殖能力,提高细胞放射敏感性,其作用机制可能与细胞周期变化、细胞凋亡以及DNA双链的断裂与修复有关.