目的:探究
BMAL1基因对耐放射鼻咽癌细胞株(5-8FR)增殖、迁移和侵袭能力的影响及分子机制。
方法:小剂量分次照射构建鼻咽癌耐放射细胞5-8FR,运用克隆形成实验结果拟合多靶单击模型并计算放疗增敏比。通过蛋白质印迹实验检测5-8FR和对照组5-8F细胞株中PI3K/Akt/MMP-2/9信号通路相关蛋白的表达。构建
BMAL1基因的高表达及敲除载体,分别转染鼻咽癌细胞株5-8F和耐放射细胞株5-8FR,获得
BMAL1基因过表达(pcDNA-BMAL1)及其对照组(pcDNA)和干扰(BMAL1-shRNA)及对照组(con-shRNA)的稳转细胞株。蛋白质印迹法验证感染效率,检测两组细胞过表达或干扰
BMAL1基因后PI3K/Akt/MMP-2/9信号通路相关蛋白的改变情况。采用CCK-8法、划痕实验、Transwell法检测过表达及干扰
BMAL1基因后耐放疗细胞株5-8FR增殖、迁移和侵袭能力的变化。
结果:鼻咽癌耐放射细胞株中
BMAL1基因表达下调,PI3K/Akt通路蛋白及下游相关分子MMP-2、MMP-9表达增加,TIMP-2、TIMP-1表达降低。过表达
BMAL1基因可抑制PI3K/Akt通路蛋白及下游相关分子MMP-2、MMP-9表达,促进TIMP-2、TIMP-1表达,抑制耐放射鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,干扰
BMAL1基因则结果相反。
作者:黎钰欣;赵朝芬;刘丽娜;贺前勇;徐歆宇;周定安;周建奖;金风
来源:中华放射肿瘤学杂志 2022 年 31卷 11期