目的 观察外源性降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)、P物质(substance P,SP)对大鼠骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖的影响,并探讨其机制.方法 使用全骨髓法分离、培养大鼠BMSCs,采用RT-PCR、Western Blot在传代培养的不同时间(1、2、3周)检测BMSCs神经肽受体mRNA、蛋白的表达情况.在不同时间点(1、3、5、7、9 d)使用浓度为1×10-8 mol/L的CGRP、SP分别作用于BMSCs,使用MTT比色法检测BMSCs增殖能力,Western Blot法检测BMSCs细胞周期相关调控基因cyclin D1、cyclin E、p53的蛋白表达变化.结果 RT-PCR、Western Blot结果显示BMSCs稳定表达CGRP受体、SP受体,同一时间点的CGRP受体表达高于SP受体表达.MTT结果显示,与对照组相比,CGRP在9d时促进BMSCs增殖,SP在7、9 d时促进BMSCs增殖.Western Blot结果显示,与对照组相比,CGRP促进BMSCs内cyclin D1、cyclin E蛋白表达,在5 d时达到高峰;SP促进BMSCs内cyclin E蛋白表达,在5 d时达到高峰;两种神经肽均降低BMSCs内p53蛋白表达.结论 CGRP、SP对BMSCs的增殖有直接促进作用,影响细胞周期相关调控基因蛋白的表达是其作用机制之一.

作者：王钊；金丹；文君；陀泳华；郭小磊

来源：中华骨科杂志 2010 年 30卷 12期