目的尝试用抗体工程技术研制乙型肝炎导向干扰素。方法利用PCR技术进行体外重组,将α-2b干扰素(IFN-α2b)基因分别与抗-HBsAg人源抗体的轻链及重链Fd基因融合,IFN-α2b基因位于融合基因的3'端,为避免干扰素结构域与抗体结构域在空间上互相影响,在二者之间引入一条15个氨基酸的柔性短肽。分别构建上述融合肽链的CHO表达质粒(轻链-IFN表达质粒pLIC以pcDNA3.1(+)为载体,重链Fd-IFN表达质粒pFID以pCdhfr1为载体),表达质粒以下述三种组合转染CHO(dhfr-)细胞:I, pLIC + pHFD; II, pLIC + pFID; III, pLFC + pFID。其中pLFC为抗-HBsAg轻链全长表达质粒,pHFD为抗-HBsAg重链全长表达质粒。结果 I组和II组上清液具有干扰素活性,但仅I组具有HBsAg结合活性。结论用基因工程的手段成功地在CHO细胞中表达了具有HBsAg结合能力的融合干扰素分子。
作者:童贻刚;王海涛;徐静;付玲;于长明;刘国奇
来源:中华肝脏病杂志 2001 年 9卷 2期