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目的研究化学合成抗结缔组织生长因子(CTGF)小干扰RNA(siRNA)对肝星状细胞(HSC)CTGF基因表达及合成分泌细胞外基质(ECM)的影响.方法将化学合成抗CTGF siRNA以Oligofectamine包裹,转染HSC T6细胞,设空白对照,抽提孵育24、48、72 h细胞总RNA及蛋白质,并收集培养上清液,应用western blot和(或)逆转录聚合酶链反应检测HSC T6细胞CTGF及I、Ⅲ型胶原基因表达,应用放射免疫法检测培养上清液中透明质酸及Ⅲ型前胶原含量.结果与空白对照相比,转染siRNA的HSC T6细胞CTGF及I、Ⅲ型胶原基因表达水平显著下调,培养上清液中透明质酸及Ⅲ型前胶原含量24、4 8、72 h分别降低46

作者:李光明;史毅;李定国;谢青;郭清;金由辛

来源:中华肝脏病杂志 2004 年 12卷 9期

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作者:
李光明;史毅;李定国;谢青;郭清;金由辛
来源:
中华肝脏病杂志 2004 年 12卷 9期
标签:
肝纤维化 肝星状细胞 RNA干扰 结缔组织生长因子
目的研究化学合成抗结缔组织生长因子(CTGF)小干扰RNA(siRNA)对肝星状细胞(HSC)CTGF基因表达及合成分泌细胞外基质(ECM)的影响.方法将化学合成抗CTGF siRNA以Oligofectamine包裹,转染HSC T6细胞,设空白对照,抽提孵育24、48、72 h细胞总RNA及蛋白质,并收集培养上清液,应用western blot和(或)逆转录聚合酶链反应检测HSC T6细胞CTGF及I、Ⅲ型胶原基因表达,应用放射免疫法检测培养上清液中透明质酸及Ⅲ型前胶原含量.结果与空白对照相比,转染siRNA的HSC T6细胞CTGF及I、Ⅲ型胶原基因表达水平显著下调,培养上清液中透明质酸及Ⅲ型前胶原含量24、4 8、72 h分别降低46