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目的 探讨化学缺氧对大鼠HSC MMP-2的表达和活性的影响及其调节机制.方法 用不同浓度的氯化钴(CoCl2,0、50、100、200 μmol/L)造成大鼠HSC化学缺氧,RT-PCR、酶图法分别检测MMP-2 Mrna表达及其酶活性;Western blot检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达;用荧光素酶报告基因分析技术测HIF-1α对MMP-2基因的激活作用.结果 随CoCl2浓度从0μmol/L依次递增到200μmol/L,MMP-2 Mrna表达的量(用吸光度值表示)从0.53±0.12依次上调到1.57±0.11,4组间差异有统计学意义(F=34.21,P<0.01),其活性下降幅度(用吸光度值表示)从84.49±5.38逐渐下降至53.70±3.42,4组间差异有统计学意义(F=29.54,P<0.01),HIF-1α表达量依次增加;核蛋白提取物与MMP-2基因探针(含缺氧反应元件)共浴后,电泳迁移条带产生延迟现象,竞争性序列能部分拮抗其结合.结论 化学缺氧能使HSC MMP-2 Mrna表达上调,酶活性下降.HIF-1α可能参与了缺氧条件下MMP-2的表达调节.

作者:范任华;陈平圣;赵迪;张万东

来源:中华肝脏病杂志 2007 年 15卷 9期

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作者:
范任华;陈平圣;赵迪;张万东
来源:
中华肝脏病杂志 2007 年 15卷 9期
标签:
肝纤维化 缺氧 基质金属蛋白酶-2 肝星状细胞 缺氧诱导因子-1α
目的 探讨化学缺氧对大鼠HSC MMP-2的表达和活性的影响及其调节机制.方法 用不同浓度的氯化钴(CoCl2,0、50、100、200 μmol/L)造成大鼠HSC化学缺氧,RT-PCR、酶图法分别检测MMP-2 Mrna表达及其酶活性;Western blot检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达;用荧光素酶报告基因分析技术测HIF-1α对MMP-2基因的激活作用.结果 随CoCl2浓度从0μmol/L依次递增到200μmol/L,MMP-2 Mrna表达的量(用吸光度值表示)从0.53±0.12依次上调到1.57±0.11,4组间差异有统计学意义(F=34.21,P<0.01),其活性下降幅度(用吸光度值表示)从84.49±5.38逐渐下降至53.70±3.42,4组间差异有统计学意义(F=29.54,P<0.01),HIF-1α表达量依次增加;核蛋白提取物与MMP-2基因探针(含缺氧反应元件)共浴后,电泳迁移条带产生延迟现象,竞争性序列能部分拮抗其结合.结论 化学缺氧能使HSC MMP-2 Mrna表达上调,酶活性下降.HIF-1α可能参与了缺氧条件下MMP-2的表达调节.