目的 评价乙型肝炎病毒核心蛋白作为类病毒颗粒载体融合表面抗原"a"决定簇的基因疫苗和蛋白疫苗的免疫效果,为寻求有效的慢性乙型肝炎治疗性疫苗奠定基础.方法 体外分别扩增编码乙型肝炎病毒HBsAg 100～162 aa部分、HBcAg 1～78 aa部分和HBcAg 83～144aa的基因序列,目的 基因连接后定向克隆到真核表达载体pcDNA3的多克隆位点内.将嵌合基因亚克隆到原核表达载体,诱导表达并纯化获得融合蛋白.分别用真核表达质粒和纯化融合蛋白免疫BALB/c小鼠,加强免疫并定期采血,检测血清中特异性抗体并进行淋巴细胞增殖实验以评价体液和细胞免疫应答效果.实验结果进行重复测量资料的方差分析和单向方差分析. 结果嵌合基因免疫后可以产生有效的抗-HBs"体液免疫"应答,免疫0、2、4、6、8、10、12,14周时的S/N值分别为1.05±0.20、2.69±0.38、4.48±0.50、6.61±0.49、6.95±0.19、7.43±0.31、8.11±0.14、7.43±0.31,F值分别为1202.021和200.059,P<0.01.未引起明显的抗-HBc"体液免疫"应答却获得了明显的HBcAg特异性细胞免疫应答.融合蛋白免疫后也能获得有效的抗-HBs"体液免疫"应答,但针对HacAg的体液应答却较强;可以产生较强的HBcAg特异性增殖反应,而没有明显的HBsAg特异性增殖反应.嵌合基因免疫组较融合蛋白组的细胞免疫
作者：李磊；田拥军；沈鸿；赵西平；杨东亮
来源：中华肝脏病杂志 2009 年 17卷 4期
