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目的 了解HBV及其抗原成分对干扰素(IFN)αJanus激酶-信号传导和转录激活子(JAK-STAT)信号传导途径分子和抗病毒蛋白表达可能存在的影响.方法以人肝胚瘤细胞株HepG2细胞为研究对象,分别经质粒转染(以能够表达完整HBV病毒颗粒或HBsAg、HBcAg的质粒pSM2、pHBS2-S和pHBc-EGFP)、病毒感染(以HepG2.2.15细胞培养上清液感染HepG2细胞,其含有完整HBV病毒颗粒和HBV抗原)以及与HBV抗原直接接触刺激等方式处理不同组HepG2细胞,以Northern blot和RT-PCR等方法分析各处理组HepG2细胞的IFN α应答情况,如检测抗病毒蛋白[如粘病毒抵抗蛋白A(MxA)、2'-5'寡腺苷酸合成酶(2'-5'OAS)、9-27等]和JAKSTAT信号传导途径分子(如STAT1)的表达.对数据进行t检验.结果 转染pSM2、pHBS2-S和pHBc-EGFP质粒后,HepG2细胞能够表达完整的HBV颗粒或HBV抗原,且随着转染时间的延长,HBV颗粒或抗原表达量逐步增多,转染48、96h的细胞培养上清液中HBsAg的S/CO值为0.81±0.11和2.35±0.33(t=10.84,P<0.05),HBeAg的S/CO值为0.69±0.06和1.79±0.13(t=18.82,P<0.05).Northern blot分析提示HepG2细胞能够表达IFN α抗病毒蛋白MxA、2',5'OAS、9-27等,但质粒转染、病毒感染和HBV抗原直接接触刺激的HepG2细胞,IFN α抗病毒蛋白MxA、2',5'OAS、9-27等的表

作者:管世鹤;杨凯;陆蒙吉;卢银平;杨东亮

来源:中华肝脏病杂志 2011 年 19卷 6期

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作者:
管世鹤;杨凯;陆蒙吉;卢银平;杨东亮
来源:
中华肝脏病杂志 2011 年 19卷 6期
标签:
肝炎病毒,乙型 干扰素α 信号传导 抗病毒蛋白 Hepatitis B virus Interferon-alpha Signal transduction Antiviral proteins
目的 了解HBV及其抗原成分对干扰素(IFN)αJanus激酶-信号传导和转录激活子(JAK-STAT)信号传导途径分子和抗病毒蛋白表达可能存在的影响.方法以人肝胚瘤细胞株HepG2细胞为研究对象,分别经质粒转染(以能够表达完整HBV病毒颗粒或HBsAg、HBcAg的质粒pSM2、pHBS2-S和pHBc-EGFP)、病毒感染(以HepG2.2.15细胞培养上清液感染HepG2细胞,其含有完整HBV病毒颗粒和HBV抗原)以及与HBV抗原直接接触刺激等方式处理不同组HepG2细胞,以Northern blot和RT-PCR等方法分析各处理组HepG2细胞的IFN α应答情况,如检测抗病毒蛋白[如粘病毒抵抗蛋白A(MxA)、2'-5'寡腺苷酸合成酶(2'-5'OAS)、9-27等]和JAKSTAT信号传导途径分子(如STAT1)的表达.对数据进行t检验.结果 转染pSM2、pHBS2-S和pHBc-EGFP质粒后,HepG2细胞能够表达完整的HBV颗粒或HBV抗原,且随着转染时间的延长,HBV颗粒或抗原表达量逐步增多,转染48、96h的细胞培养上清液中HBsAg的S/CO值为0.81±0.11和2.35±0.33(t=10.84,P<0.05),HBeAg的S/CO值为0.69±0.06和1.79±0.13(t=18.82,P<0.05).Northern blot分析提示HepG2细胞能够表达IFN α抗病毒蛋白MxA、2',5'OAS、9-27等,但质粒转染、病毒感染和HBV抗原直接接触刺激的HepG2细胞,IFN α抗病毒蛋白MxA、2',5'OAS、9-27等的表