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目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)与肝星状细胞(HSC)共培养体系中BMSC旁分泌肝细胞生长因子(HGF)对HSC凋亡的影响及其机制. 方法 用半透膜建立上下双层细胞共培养体系,各组培养24、48、72 h,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;免疫细胞化学法观察α-肌动蛋白(α-SMA)表达情况;四甲基偶氮唑盐法检测Y-27632及PHA665752的最佳干预浓度;流式细胞仪检测HSC凋亡率; Western blot、实时荧光定量PCR检测肝星状细胞RhoAmRNA及蛋白表达情况;酶联免疫吸附法检测HGF及肝细胞生长因子激活因子(HGFA)浓度.计量资料采用单因素方差分析,P< 0.05为差异有统计学意义.结果 随着时间的延长,HSC凋亡率逐渐增高,实验b组凋亡率最低,实验c组凋亡率最高,均以72 h最为显著,各组在各时段凋亡率差异具有统计学意义(P< 0.05);实验c组RhoA蛋白及mRNA表达量较其他各组明显下降,差异有统计学意义(P< 0.05);各组RhoA蛋白及mRNA表达量随时间的延长而逐渐增加;实验各组HGF浓度随时间延长逐渐降低,实验b、c组较对照组增高,差异有统计学意义(P<0.05);实验各组HGFA浓度随时间延长逐渐增高,实验b组升高最为明显,差异有统计学意义(P<0.01).结论 BMSC通过激活HGF并下调Rho通路促进肝星状细胞凋亡.

作者:韦柳萍;覃山羽;姜海行;沈妍华;孟云超

来源:中华肝脏病杂志 2014 年 22卷 3期

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作者:
韦柳萍;覃山羽;姜海行;沈妍华;孟云超
来源:
中华肝脏病杂志 2014 年 22卷 3期
标签:
肝细胞生长因子 肝细胞生长因子激活因子 肝星状细胞 骨髓间充质干细胞 Hepatocyte growth factor Hepatocyte growth factor activator Hepatic stellate cells Bone marrow mesenchymal stem cells
目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)与肝星状细胞(HSC)共培养体系中BMSC旁分泌肝细胞生长因子(HGF)对HSC凋亡的影响及其机制. 方法 用半透膜建立上下双层细胞共培养体系,各组培养24、48、72 h,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;免疫细胞化学法观察α-肌动蛋白(α-SMA)表达情况;四甲基偶氮唑盐法检测Y-27632及PHA665752的最佳干预浓度;流式细胞仪检测HSC凋亡率; Western blot、实时荧光定量PCR检测肝星状细胞RhoAmRNA及蛋白表达情况;酶联免疫吸附法检测HGF及肝细胞生长因子激活因子(HGFA)浓度.计量资料采用单因素方差分析,P< 0.05为差异有统计学意义.结果 随着时间的延长,HSC凋亡率逐渐增高,实验b组凋亡率最低,实验c组凋亡率最高,均以72 h最为显著,各组在各时段凋亡率差异具有统计学意义(P< 0.05);实验c组RhoA蛋白及mRNA表达量较其他各组明显下降,差异有统计学意义(P< 0.05);各组RhoA蛋白及mRNA表达量随时间的延长而逐渐增加;实验各组HGF浓度随时间延长逐渐降低,实验b、c组较对照组增高,差异有统计学意义(P<0.05);实验各组HGFA浓度随时间延长逐渐增高,实验b组升高最为明显,差异有统计学意义(P<0.01).结论 BMSC通过激活HGF并下调Rho通路促进肝星状细胞凋亡.