目的 通过体内转导乙型肝炎病毒(HBV) cccDNA,建立持续表达HBV抗原的小鼠乙型肝炎模型. 方法 取10只裸小鼠,将HBV cccDNA以3μg/只、2 μg/只、1μg/只分别注射实验组,同时以2ml等渗盐水注射空白组,分别于第1、3天,第1、2、3、4、5、6、8、10周进行尾静脉采血.用放射免疫法检测血清中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)浓度的变化;荧光定量PCR检测血清和肝组织中HBV DNA拷贝数;免疫组织化学法检测肝组织中HBV抗原特异性;苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化.使用SPSS 17.0对数据间相关性进行线性相关分析. 结果 小鼠在注射cccDNA后,从第1天开始于血液中检测到HBsAg和HBeAg的表达,两者均于第1周内迅速升高达到最高值,并持续至第10周;其中HBsAg的表达水平经历了两个先上升再下降的过程(第4周为较低水平,第8周为较高水平),而HBeAg的表达水平经历了三个先上升再下降的过程(第2周、第4周为较低水平,第3周、第6周为较高水平);荧光定量PCR结果表明,10周后肝组织中HBV DNA的拷贝数随着高、中、低剂量组而递减,每克肝组织中HBV DNA拷贝数[(1.14E+07)±(6.51E+06)、(9.81E+06)±(9.32E+06)、(3.72E+06)±(2.35E+ 06)]与注射的cccDNA浓度(1.5、1.0、0.5 μg/ml)呈正相关(皮尔森相关系数r=0.979).10周
作者:赵婷婷;李小松;殷文伟;蔡雪飞;张文露;陈飞兰;赖国旗;黄爱龙
来源:中华肝脏病杂志 2014 年 22卷 4期