目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白对双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)活性的影响. 方法 将表达HCV核心蛋白的真核表达质粒pCMH6K-Core转染人肝癌细胞系BEL-7402,应用干扰素(IFN) α-2b诱导内源性PKR的表达及活化,利用Western blot检测核心蛋白对PKR磷酸化的影响;将荧光素酶质粒pGL3-Promoter与不同剂量的pCMH6K-Core共转染BEL-7402细胞,进行荧光素酶活性检测,以反映核心蛋白对细胞蛋白合成的影响.计量资料以均数±标准差((x)±s)表示,组间均数比较用t检验或单因素方差分析. 结果 在IFNα-2b刺激下,表达HCV核心蛋白的BEL-7402细胞中,PKR的磷酸化水平明显低于空白质粒转染组和未转染组,而3组总PKR的表达水平无明显差别.在共转染荧光素酶质粒与核心蛋白表达质粒的BEL-7402细胞中,荧光素酶活性较共转染空白质粒组增强,且荧光素酶活性的增高与核心蛋白的表达量呈剂量依赖效应,0.5 μg、1.0μg和1.5μg的pCMH6K-Core转染组荧光素酶活性分别为空白质粒组的(1.941±0.199)倍、(2.868±0.275)倍和(3.839±0.338)倍,各组比较,P值均＜0.05. 结论 在人肝癌细胞系BEL-7402中,HCV核心蛋白能够抑制内源性PKR的活性,从而促进细胞蛋白合成.
作者：张丹；冯国和
来源：中华肝脏病杂志 2014 年 22卷 8期
