目的 研究过表达蛋白磷酸酶2A的调节亚基B(")α对肝癌细胞增殖与侵袭能力的影响. 方法 通过免疫组织化学法分析癌组织及癌周组织中PPP2R3A表达;用慢病毒载体构建稳定过表达PPP2R3A的肝癌细胞系(Huh-7和HepG2);通过CCK-8、流式细胞仪、transwell小室实验分别检测稳转肝癌细胞系增殖、周期、凋亡以及侵袭转移的生物学行为的改变,并构建裸鼠皮下瘤模型验证肝癌细胞生长情况.计量资料组间比较用t检验. 结果 人肝癌癌组织中PPP2R3A基因的表达高于癌旁;过表达PPP2R3A基因后,肝癌细胞的吸光度值(A值)增加(P<0.05);细胞周期G1期向S期转换显著增多,即细胞周期G1期减少(Huh-7:t=3.04,P=0.038 4;HepG2:t=4.06,P=0.015 3),S期增多(Huh-7:t=3.47,P=0.025 5;HepG2:t=4.46,P=0.011 2);早期凋亡率减少(Huh-7:t=7.34,P=0.001 8;HepG2:t=4.06,P=0.0153);Huh-7细胞中,迁移到下室的数目明显增多(t=3.18,P=0.033 4),铺上基质胶后到达下室的细胞数目同样增多(t=2.84,P=0.046 4);动物实验结果显示其过表达组的裸鼠皮下瘤生长显著增加(t=4.31,P=0.003 5).蛋白质印迹法实验结果显示剪切体的PARP和P53蛋白表达减少,而β-catenin蛋白在肝癌细胞的积累增多. 结论 过表达PPP2R3A基因可能促进肝癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力,抑制凋亡,
作者:陈慧娟;王培晓;黄丽虹;张红英;陈新国;张庆
来源:中华肝脏病杂志 2019 年 27卷 11期