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目的 探讨高压氧对脂肪干细胞成骨分化的影响.方法 体外分离培养小鼠脂肪干细胞并传代.取第4代脂肪干细胞植入96孔板(2×105个/孔),将细胞随机分为对照组和高压氧组.对照组利用成骨分化培养基在37℃5% CO2培养箱中进行培养,高压氧组与对照组相同的培养条件下给予高压氧干预(每24h,将细胞置于高压氧舱内,给予通纯氧10 L/min,15 min洗舱,然后将氧流量调至2~3 L/min开始升压,升压时间为20 ~ 25 min,升至压力为0.25 MPa(2.5 ATA),持续60 min,然后匀速减压,时间为20 ~ 25 min).在第7、14、21天,使用碱性磷酸酶的活性检测试剂盒检测碱性磷酸酶的活性;第14、21天,使用骨钙素定量检测试剂盒检测骨钙素浓度;第21天,茜素红染色钙化结节.数据采用两独立样本t检验、配对样本t检验、重复测量方差分析.结果 培养的细胞表达间充质干细胞标志物CD90、CD105,不表达造血细胞标志物CD34.培养7、14、21 d,与对照组比较,高压氧组碱性磷酸酶活性均明显升高[高压氧组:(29.33±3.31)、(48.47±7.62)、(46.69±5.75) U/μl,对照组:(36.50±4.56)、(61.31±6.37)、(65.99±4.56) U/μl],差异有统计学意义(均P<0.01).培养14、21 d,与对照组比较,高压氧组骨钙素浓度表达明显增加(均P<0.05).培养21 d,茜素红染色结果显示,高压氧

作者:周延华;郑海锋;曾庆鑫;付劭静;王少斌

来源:中华航海医学与高气压医学杂志 2017 年 24卷 5期

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作者:
周延华;郑海锋;曾庆鑫;付劭静;王少斌
来源:
中华航海医学与高气压医学杂志 2017 年 24卷 5期
标签:
高压氧 干细胞 脂肪干细胞 分化 Hyperbaric oxygen Stem Cell Adipose-derived stem cell Differentiation
目的 探讨高压氧对脂肪干细胞成骨分化的影响.方法 体外分离培养小鼠脂肪干细胞并传代.取第4代脂肪干细胞植入96孔板(2×105个/孔),将细胞随机分为对照组和高压氧组.对照组利用成骨分化培养基在37℃5% CO2培养箱中进行培养,高压氧组与对照组相同的培养条件下给予高压氧干预(每24h,将细胞置于高压氧舱内,给予通纯氧10 L/min,15 min洗舱,然后将氧流量调至2~3 L/min开始升压,升压时间为20 ~ 25 min,升至压力为0.25 MPa(2.5 ATA),持续60 min,然后匀速减压,时间为20 ~ 25 min).在第7、14、21天,使用碱性磷酸酶的活性检测试剂盒检测碱性磷酸酶的活性;第14、21天,使用骨钙素定量检测试剂盒检测骨钙素浓度;第21天,茜素红染色钙化结节.数据采用两独立样本t检验、配对样本t检验、重复测量方差分析.结果 培养的细胞表达间充质干细胞标志物CD90、CD105,不表达造血细胞标志物CD34.培养7、14、21 d,与对照组比较,高压氧组碱性磷酸酶活性均明显升高[高压氧组:(29.33±3.31)、(48.47±7.62)、(46.69±5.75) U/μl,对照组:(36.50±4.56)、(61.31±6.37)、(65.99±4.56) U/μl],差异有统计学意义(均P<0.01).培养14、21 d,与对照组比较,高压氧组骨钙素浓度表达明显增加(均P<0.05).培养21 d,茜素红染色结果显示,高压氧