目的 研究模拟微重力诱导小鼠成骨细胞微丝结构改变对碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)及骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)的影响,探讨失重导致骨质疏松的机制.方法本研究以已建株的小鼠成骨样细胞株(MC3T3-E1)作为对象,以回转器模拟微重力效应.实验将细胞分为4组:模拟微重力组、0.5 μg/ml细胞松弛素B组、模拟微重力+0.5 μg/ml细胞松弛素B组及正常重力组(对照组).培养48 h后,利用异硫氰酸荧光素鬼笔环肽(fluoresceine isothiocyanate phalloidin,FITC-phalloidin)进行免疫荧光染色,在激光共聚焦显微镜下观察各组细胞微丝的变化;同时用ALP试剂检测各组细胞培养液内ALP的酶活性,采用ELISA法检测各组细胞裂解液中OCN的表达量.结果 除正常重力组外,其余各组细胞微丝结构都出现了不同程度的解聚,张力纤维减少,失去方向性,以模拟微重力+0.5 μg/ml细胞松弛素B组改变最为明显.和正常重力组比较,其余各组ALP的酶活性和OCN的表达量均成下降趋势(F=17.23、121.91,P<0.01),且模拟微重力+0.5 μg/ml细胞松弛素B组与模拟微重力组和0.5 μg/ml细胞松弛素B组这两组之间的差别都有统计学意义(P<0.05).结论 微重力影响成骨细胞ALP的酶活性及OCN的表达可能与微重力诱导细胞骨架微丝解聚相关.
作者:王脉桃;黄震;杨力;陈宏;苏嘉霖;麦燕兴;杨锐;周焕成
来源:中华航空航天医学杂志 2011 年 22卷 2期