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目的观察脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)对大鼠肺微血管内皮细胞(LMECs)水通道蛋白1(AQP-1)表达和功能的影响;同时在LPS诱发的大鼠急性肺损伤(ALI)模型观察AQP-1、AQP-5表达的变化.方法 (1)体外实验:将第3代LMECs随机分为LPS组、TNF-α组、IL-1β组和DMEM对照组,实验组分别给予LPS、TNF-α、IL-1β刺激,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定AQP-1 mRNA的表达以及免疫组化测定AQP-1蛋白表达,同时采用放射性核素示踪法测定LMECs内氚水(3H2O)的放射强度.(2)体内实验:40只雄性Wistar大鼠随机分为LPS 2 h组、LPS 4 h组、LPS 6 h组、LPS 8 h组和对照组,LPS各组制成ALI模型,采用RT-PCR测定ALI大鼠AQP-1、AQP-5 mRNA表达以及免疫组化观察AQP-1、AQP-5蛋白表达.结果 (1)体外实验:LPS、TNF-α、IL-1β组LMECs AQP-1 mRNA和蛋白表达显著低于DMEM对照组(mRNA表达分别为0.428±0.026、0.446±0.029、0.454±0.023和0.793±0.035,蛋白表达分别为0.366±0.009、0.374±0.014、0.377±0.007和0.660±0.013,P均<0.01);且LMECs内3H2O掺入量[(726±58)、(738±45)、(774±44)脉冲数/min]也显著低于DMEM对照组[(1 148±70)脉冲数/min,P均<0.01].(2)体内实验:ALI大鼠肺组织AQP-1、AQP-5 mRNA表

作者:谢艳萍;陈才平;王建春;钱桂生;王应灯;肖贞良

来源:中华结核和呼吸杂志 2005 年 28卷 6期

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作者:
谢艳萍;陈才平;王建春;钱桂生;王应灯;肖贞良
来源:
中华结核和呼吸杂志 2005 年 28卷 6期
标签:
肺损伤,急性 水通道蛋白 内皮细胞 脂多糖类
目的观察脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)对大鼠肺微血管内皮细胞(LMECs)水通道蛋白1(AQP-1)表达和功能的影响;同时在LPS诱发的大鼠急性肺损伤(ALI)模型观察AQP-1、AQP-5表达的变化.方法 (1)体外实验:将第3代LMECs随机分为LPS组、TNF-α组、IL-1β组和DMEM对照组,实验组分别给予LPS、TNF-α、IL-1β刺激,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定AQP-1 mRNA的表达以及免疫组化测定AQP-1蛋白表达,同时采用放射性核素示踪法测定LMECs内氚水(3H2O)的放射强度.(2)体内实验:40只雄性Wistar大鼠随机分为LPS 2 h组、LPS 4 h组、LPS 6 h组、LPS 8 h组和对照组,LPS各组制成ALI模型,采用RT-PCR测定ALI大鼠AQP-1、AQP-5 mRNA表达以及免疫组化观察AQP-1、AQP-5蛋白表达.结果 (1)体外实验:LPS、TNF-α、IL-1β组LMECs AQP-1 mRNA和蛋白表达显著低于DMEM对照组(mRNA表达分别为0.428±0.026、0.446±0.029、0.454±0.023和0.793±0.035,蛋白表达分别为0.366±0.009、0.374±0.014、0.377±0.007和0.660±0.013,P均<0.01);且LMECs内3H2O掺入量[(726±58)、(738±45)、(774±44)脉冲数/min]也显著低于DMEM对照组[(1 148±70)脉冲数/min,P均<0.01].(2)体内实验:ALI大鼠肺组织AQP-1、AQP-5 mRNA表