目的 探讨整合素β1基因沉默对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道平滑肌细胞(ASMC)增殖和分泌功能的影响.方法 原代培养正常及哮喘模型小鼠ASMC,分别取各自第5代ASMC进行实验,利用RNA干扰(RNAi)技术沉默ASMC的整合素β1基因,RT-PCR技术观察沉默前后ASMC整合素β1 mRNA表达水平变化,蛋白印迹检测沉默前后ASMC整合素β1蛋白含量变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测整合素β1基因沉默前后ASMC细胞增殖变化;流式细胞仪测定整合素β1基因沉默前后ASMC细胞周期分布及细胞凋亡率变化情况;ELISA检测整合素β1 基因沉默前后ASMC分泌的白细胞介素(IL)-6及受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)的含量变化.结果 (1)哮喘PBS对照组RT-PCR显示整合素β1 mRNA(0.907±0.041)较正常PBS对照组(0.527±0.027)显著增高(t=24.632,P<0.05),哮喘siRNA干预组(0.503±0.034)较哮喘PBS对照组明显减低(t=24.079,P<0.05),正常siRNA干预组较正常PBS对照组无显著性变化(t=1.077,P>0.05);(2)Western blot检测显示哮喘PBS对照组整合素β1蛋白表达(0.733±0.067)较正常PBS对照组(0.386±0.044)显著增高(t=13.622,P<0.05),哮喘siRNA干预组(0.453±0.074)较哮喘PBS对照组显著减低(t=8.880,P<0.05),正常siRNA干预组较正常PBS对照组无显著性
作者:邱晨;刁振华;齐晖;李娜;任莉莉;张婷
来源:中华结核和呼吸杂志 2010 年 33卷 11期