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目的 观察高磷对大鼠血管平滑肌细胞(RVSMC)钙化的影响,及探讨阿托伐他汀在RVSMC钙化中的保护作用及相关机制.方法 用不同的试剂培养RVSMC,分别为正常磷组(Pi 1.4 mmol/L)、高磷组(Pi 2.0 mmol/L、2.6 mmol/L)、凋亡抑制组(Pi 2.6 mmol/L+ZVAD-FMK 0.1 μmol/L、Pi 2.6 mmol/L+ZVAD-FMK 1.0 μmol/L、Pi 2.6 mmol/L+ZVAD-FMK2.0 μmol/L)和阿托伐他汀组(H 2.6 mmol/L+Statin 1 nmol/L、Pi 2.6 mmol/L+Stain 10 nmol/L、Pi 2.6 mmol/L+Statin 100 nmol/L).甲O-酚酞络合酮方法测定平滑肌细胞钙含量,BCA法测定蛋白含量,用蛋白含量标化钙含量,同时以von Kossa染色观察细胞钙化情况.ELISA方法测定不同时间各组细胞的相对凋亡量.结果 (1)培养第3、6、9天时,Pi 2.0 mmol/L、Pi 2.6mmol/L组与Pi 1.4 mmol/L组相比,RVSMC钙沉积较多(P<0.05).(2)培养第6天时,Pi 2.6mmol/L+ZVAD-FMK 1.0 μmol/L、Pi 2.6 mmol/L+ZVAD-FMK 2.0 μmol/L组与Pi 2.6 mmol/L组相比,RVSMC钙沉积较少(P<0.05);Pi 2.6 mmol/L+Statin 10 nmol/L、Pi 2.6 mmol/L+Statin100 nmol/L组与Pi 2.6 mmol/L组相比,细胞钙沉积较少(P<0.05).von Kossa染色显示Pi2.6 mmol/L组细胞有大量黑色颗粒沉积,而Pi 2.6 mmol/L+Statin 100 nmol/L组较少.(3)培养第3、

作者:战晓丽;袁伟杰;于建平;傅鹏;郭云珊;刘凌

来源:中华肾脏病杂志 2008 年 24卷 7期

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作者:
战晓丽;袁伟杰;于建平;傅鹏;郭云珊;刘凌
来源:
中华肾脏病杂志 2008 年 24卷 7期
标签:
肌细胞,平滑肌 钙质沉着症 细胞凋亡 高磷 阿托伐他汀 Myocytes,smooth muscle Calcinosis Apoptosis Hyperphosphate Atorvastatin
目的 观察高磷对大鼠血管平滑肌细胞(RVSMC)钙化的影响,及探讨阿托伐他汀在RVSMC钙化中的保护作用及相关机制.方法 用不同的试剂培养RVSMC,分别为正常磷组(Pi 1.4 mmol/L)、高磷组(Pi 2.0 mmol/L、2.6 mmol/L)、凋亡抑制组(Pi 2.6 mmol/L+ZVAD-FMK 0.1 μmol/L、Pi 2.6 mmol/L+ZVAD-FMK 1.0 μmol/L、Pi 2.6 mmol/L+ZVAD-FMK2.0 μmol/L)和阿托伐他汀组(H 2.6 mmol/L+Statin 1 nmol/L、Pi 2.6 mmol/L+Stain 10 nmol/L、Pi 2.6 mmol/L+Statin 100 nmol/L).甲O-酚酞络合酮方法测定平滑肌细胞钙含量,BCA法测定蛋白含量,用蛋白含量标化钙含量,同时以von Kossa染色观察细胞钙化情况.ELISA方法测定不同时间各组细胞的相对凋亡量.结果 (1)培养第3、6、9天时,Pi 2.0 mmol/L、Pi 2.6mmol/L组与Pi 1.4 mmol/L组相比,RVSMC钙沉积较多(P<0.05).(2)培养第6天时,Pi 2.6mmol/L+ZVAD-FMK 1.0 μmol/L、Pi 2.6 mmol/L+ZVAD-FMK 2.0 μmol/L组与Pi 2.6 mmol/L组相比,RVSMC钙沉积较少(P<0.05);Pi 2.6 mmol/L+Statin 10 nmol/L、Pi 2.6 mmol/L+Statin100 nmol/L组与Pi 2.6 mmol/L组相比,细胞钙沉积较少(P<0.05).von Kossa染色显示Pi2.6 mmol/L组细胞有大量黑色颗粒沉积,而Pi 2.6 mmol/L+Statin 100 nmol/L组较少.(3)培养第3、