目的 探讨酸性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响及可能机制.方法 将22只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭组(5/6肾切除术构建慢性肾衰竭大鼠模型,甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭血管钙化组(甲基纤维素加骨化三醇灌胃)、酸干预组[甲基纤维素及骨化三醇灌胃加氯化铵(0.28 mmol/L)饮水].采用von Kossa染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测胸主动脉钙化情况;免疫组织化学方法检测胸主动脉runt相关转录因子2 (runt-related transcription factor 2,runx2)和L型钙通道(calcium channels,Ltype,LTCC) β3亚基表达.体外原代培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs),用β-甘油磷酸盐(β-glycerophosphate,β-GP)诱导钙化.将细胞随机分为4组:正常+pH7.4组、高磷+pH7.4组(10 mmol/L β-GP)、高磷+pH7.1组(高磷培养基基础上添加盐酸调整pH值为7.1)和维拉帕米干预组[高磷培养基基础上添加维拉帕米(调整浓度为20 mmol/L)].采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况;酶联免疫吸附法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性;钙离子探针Fluo-3/AM检测血管平滑肌细胞胞外钙离子内流的效应变化;RT-PCR和Western印迹法检测LTCCβ3亚基、runx2的表达.结果 体内实验中,成功制备了慢性肾衰竭大鼠的血管

作者：张胜雷；徐金升；冯雨；张俊霞；崔立文；何雷；俞啟遥；白亚玲

来源：中华肾脏病杂志 2015 年 31卷 12期