目的 探讨间歇性碱刺激对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化的影响及其机制.方法 体外分离培养大鼠VSMC,将传代培养至第4代的细胞按随机数字表法分为正常对照组、高磷+ pH7.4组、高磷+pH7.5组、高磷+pH7.6组和高磷+pH7.7组.正常对照组采用含10％胎牛血清的培养基培养,其他各组采用含10 mmol/L β-甘油磷酸的高磷培养基培养,然后分别加入7.4％ NaHCO3调整pH值为7.4、7.5、7.6和7.7.干预4h后,正常对照组更换正常培养基,其余4组的培养基均更换为高磷基础上pH值为7.4的培养基,然后隔ld更换培养基1次.干预4d后,分别应用RT-PCR和Western blot检测VSMC的L型钙通道(LTCC) β3亚基和Runt相关转录因子2(Runx2) mRAN和蛋白的表达水平;干预4d后,应用钙离子探针Fluo-3/AM检测VSMC内钙离子水平;干预14 d后,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定碱性磷酸酶(ALP)活性;干预14 d后,通过测量钙含量观察细胞钙化程度.结果 (1)与正常对照组比较,高磷+ pH7.4组LTCC β3亚基mRNA和蛋白表达水平均较高(分别为0.49±0.03比0.23±0.02和0.45±0.03比0.26±0.02,P均＜0.05);与高磷+ pH7.4组比较,高磷+pH7.5组LTCCβ3亚基mRNA(0.86±0.05)和蛋白(0.62±0.04)表达水平均较高(P均＜0.05);与高磷+pH7.5组比较,高磷+pH7.6组LTCC β3亚基mR

作者：白亚玲；徐金升；田恬；张俊霞；崔立文；张慧然；张胜雷

来源：中华心血管病杂志 2017 年 45卷 6期