目的 探讨中电导钙激活钾离子通道(KCa3.1)抑制剂1-[(2-氯苯基)二苯甲基]-1H-吡唑(TRAM-34)对高磷诱导大鼠胸主动脉平滑肌细胞钙化的作用及其机制.方法 体外培养原代大鼠主动脉平滑肌细胞和胸主动脉环,将传代培养至第4代的细胞和血管环均分为3组:对照组(加入含10%胎牛血清的DMEM培养基)、高磷组(在对照组培养基的基础上,加入10 mmol/L β-甘油磷酸)和TRAM-34干预组(在高磷组培养基的基础上,加入20 nmol/L TRAM-34).采用邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞和血管环的钙含量;采用荧光探针法测定胸主动脉平滑肌细胞内的钙离子浓度;采用RT-PCR和Western blot检测各组细胞中调节成骨和软骨分化的Runt相关转录因子2(Runx2)的表达水平;采用免疫组织化学法检测各组胸主动脉环中Runx2的表达水平;采用磷酸苯二钠法测定胸主动脉平滑肌细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性.结果 (1)胸主动脉平滑肌细胞体外培养12 d后,高磷组钙含量高于对照组[(121.67 ±6.17) mg/g蛋白比(84.38±8.17) mg/g蛋白,P<0.05],TRAM-34干预组钙含量[(93.31 ±11.36) mg/g蛋白]低于高磷组(P<0.05).胸主动脉环体外培养12 d后,高磷组钙含量高于对照组[(7.17 ±0.57) mg/g蛋白比(1.18 ±0.13) mg/g蛋白,P<0.05],TRAM-34干预组钙含量[(4.71 ±0.42) mg/g蛋白
作者:张胜雷;徐金升;杨硕;白亚玲;张俊霞;崔立文;俞啟遥
来源:中华心血管病杂志 2016 年 44卷 6期