目的 探讨高磷诱导的磷酸钙晶体是否通过BMP-2/Smad信号通路激活人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)成骨转分化.方法 高磷培养基在37℃孵育3d,超速离心法分离磷酸钙晶体和上清液,扫描电镜和能量色散X射线光谱仪分析晶体理化特征.体外培养HASMCs,分为高磷组、对照组、晶体组和上清液组.茜素红染色和邻甲酚酞络合酮法测钙化结节和细胞内钙含量.Western印迹法测骨形态发生蛋白2(BMP-2)、转录因子RUNX2、骨桥蛋白(OPN)、磷酸Smad 1/5/9(p-Smad 1/5/9)蛋白表达.HASMCs分别进行BMP-2和Smad1基因敲减,Western印迹法测蛋白表达.结果 高磷培养基诱导磷酸钙晶体形成.与对照组相比,磷酸钙晶体促进HASMCs钙化结节形成,增加细胞内钙含量,上调BMP-2、RUNX2和OPN蛋白表达(均P＜ 0.05).磷酸钙晶体刺激HASMCs 30 min后,p-Smad 1/5/9蛋白水平达到峰值(P＜0.05).敲减BMP-2基因后,磷酸钙晶体刺激HASMCs后p-Smad1蛋白表达受抑,RUNX2和OPN蛋白表达降低(均P＜0.05).敲减Smad1基因后,磷酸钙晶体刺激HASMCs后RUNX2和OPN蛋白表达降低(均P＜0.05).结论 高磷诱导的磷酸钙晶体通过BMP-2/Smad信号通路促进HASMCs成骨转分化.
作者：刘曜蓉；严豪；李振元；宫丽；杨晓晓；曹励欧；倪兆慧；钱家麒；方炜
来源：中华肾脏病杂志 2018 年 34卷 8期
