目的 分离培养并鉴定大鼠不同分支级别肺动脉平滑肌细胞(PASMC),观察其对血小板源性生长因子(PDGF)反应性的差异,探讨相同刺激因素下,不同级别肺血管病理改变不同的细胞学机制.方法 分离SD大鼠肺动脉并按解剖学分支分为3组:大动脉组,包括肺动脉干及肺内一级主干;中动脉组,指肺内主干二、三级分支;小动脉组,包括肺内动脉四级及以上分支.分离培养不同分支PASMC并用平滑肌细胞抗体进行免疫荧光染色鉴定.给予PDGF刺激,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;Western blot方法测定增殖细胞核抗原表达水平变化以反映细胞增殖能力;伤口愈合实验检测细胞迁移能力的变化.结果 不同分支PASMC在光学显微镜下观察无明显差别;免疫荧光染色结果显示,三种常用的平滑肌细胞标志物即平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、钙结合蛋白(S100A4)和平滑肌调宁蛋白(calponin)抗体染色均呈阳性,各组间荧光强度无明显差异.正常培养条件下3组细胞增殖率分别为(137.0±12.1)％、(166.1±23.6)％、(156.8±2.5)％,Western blot检测PCNA表达灰度值分别为(0.41±0.10)、(0.55±0.18)和(0.48±0.28),迁移到空白区域的细胞个数分别为(49±14)、(68±13)和(71±7),组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).给予10 μg/LPDGF干预48 h后,中、小动脉组PASMC的
作者：国桓；杨汀；王望；刘杰；孙然；王军；王辰
来源：中华结核和呼吸杂志 2014 年 37卷 5期
